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Cell Explorer 活細(xì)胞示蹤試劑盒藍(lán)色熒光是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于標(biāo)記活細(xì)胞的試劑盒，我們的Cell Explorer 熒光成像試劑盒是一套用于標(biāo)記細(xì)胞的工具，用于細(xì)胞功能的熒光顯微鏡研究。細(xì)胞的有效標(biāo)記為研究時(shí)空背景下的細(xì)胞事件提供了一種有力的方法。該特定試劑盒設(shè)計(jì)用于以藍(lán)色熒光均勻標(biāo)記活細(xì)胞，用于需要將熒光標(biāo)簽分子保留在細(xì)胞中相對較長時(shí)間的研究。該試劑盒使用帶有細(xì)胞保留部分的弱熒光染料。染料進(jìn)入活細(xì)胞時(shí)會發(fā)出強(qiáng)烈的熒光，并被捕獲在活細(xì)胞內(nèi)部以在相對較長的時(shí)間內(nèi)提供穩(wěn)定的熒光信號。該染料是疏水性化合物，易于滲透完整的活細(xì)胞。需要最少的動(dòng)手時(shí)間。它可以很容易地適應(yīng)各種熒光平臺，例如微孔板檢測，免疫細(xì)胞化學(xué)和流式細(xì)胞儀。它可用于多種研究，包括細(xì)胞粘附，趨化性，多藥耐藥性，細(xì)胞生存力，細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性。該試劑盒為所有基本組件提供了優(yōu)化的細(xì)胞標(biāo)記方案。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的Cell Explorer 活細(xì)胞示蹤試劑盒藍(lán)色熒光。

適用儀器

流式細(xì)胞儀
Ex:	350 nm or 405 nm
Em：	450/40 nm
通道:	Pacific Blue 通道

熒光顯微鏡
Ex:	DAPI 濾波片組
Em：	DAPI 濾波片組
推薦孔板:	黑色透明底板

實(shí)驗(yàn)方案

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡要概述

1.準(zhǔn)備樣品
2.從培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞板
3.添加10X Track It Blue工作溶液（10 µL /孔）
4.將細(xì)胞在室溫下染色15至60分鐘
5.清洗細(xì)胞
6.在熒光顯微鏡下用DAPI濾光片或流式細(xì)胞儀在Ex / Em = 360/445 nm下檢查標(biāo)本

溶液配制

1.儲備溶液配制

所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1. Track It 藍(lán)色儲備溶液（2mM）：
將25 µL DMSO（組分B）添加到一小瓶Track It Blue（組分A）中，并充分混合以制成2mM Track It Blue儲備液。

2.工作溶液配制

將2 mM Track It Blue儲備溶液稀釋到測定緩沖液（組分C）中，制成5至50μMTrack It Blue工作溶液。 Track It Blue工作溶液應(yīng)以適當(dāng)?shù)臐舛葹?0μL/孔的所有孔準(zhǔn)備足夠。例如，要獲得一塊96孔微孔板濃度為20μM的Track It Blue，可將10μLTrack It Blue儲備液稀釋到1 mL的測定緩沖液（組分C）中，制成1 mL的20 μM（10倍）Track It Blue工作解決方案。注意：對于不同的細(xì)胞類型和/或?qū)嶒?yàn)條件，應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定Track It Blue的濃度。建議以至少十倍以上的濃度進(jìn)行測試。注意：我們發(fā)現(xiàn)孔濃度為2 uM對于大多數(shù)細(xì)胞系而言已足夠。

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樣品示例及操作

1.向細(xì)胞孔中加入10X Track It Blue工作溶液，該溶液應(yīng)等于細(xì)胞培養(yǎng)基體積的1/10。例如，對于96孔板，將10μL/孔的10X Track It Blue工作溶液添加到細(xì)胞中。

2.將細(xì)胞在37°C，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育15至60分鐘。

3.用Hanks和20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌細(xì)胞。

4.用生長培養(yǎng)基填充細(xì)胞孔。

5.使用帶有DAPI濾光片的熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀在Ex / Em = 360/445 nm處分析細(xì)胞。