Alarm-Blue細(xì)胞增殖與活性檢測試劑盒

    貨號                      規(guī)格

 BDXB0003-5      5ml (500次) 

BDXB0003-10    10ml (1000次) 

BDXB0003-30     30ml (3000次) 

保存：4℃避光保存，保質(zhì)期20個月 

產(chǎn)品概述 

      在細(xì)胞增殖過程中，細(xì)胞內(nèi)NADPH/NADP、 FADH/FAD、 FMNH/FMN和NADH/NAD 的比值升高，處于還原環(huán)境。攝入細(xì)胞內(nèi)的染料被這些代謝中間體及細(xì)胞色素類還原后釋放 到細(xì)胞外并溶于培養(yǎng)基中，使培養(yǎng)基從無熒光的靛青藍(lán)變成有熒光的粉紅色。最后用普通分 光光度計或熒光光度計進行檢測，吸光度和熒光強度與活性細(xì)胞數(shù)成正比。Alarm-Blue檢測 試劑為細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測提供了一種簡便、快速、可靠、安全的方法，適用于高通量檢測實驗。

  該檢測試劑的主要成分是一種氧化還原指示劑。其在氧化狀態(tài)下呈現(xiàn)靛青藍(lán)無熒 光性，而在還原狀態(tài)下，轉(zhuǎn)變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產(chǎn)物，其吸收峰為530-560nm，發(fā) 射峰為590nm。本產(chǎn)品無細(xì)胞毒性，不影響細(xì)胞代謝、細(xì)胞因子分泌、抗體合成等，檢測后 的細(xì)胞仍然可以進行后續(xù)實驗。

細(xì)胞活力檢測試劑盒比較

適用范圍：

     適用于細(xì)菌、酵母類、昆蟲類、魚類、哺乳類等多種細(xì)胞， 以及貼壁細(xì)胞與非貼壁細(xì)胞的檢測，可以廣泛用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性以及病原微生物的快速檢測與鑒定。 

使用方法： 

1. 在待測樣品中加入10%細(xì)胞懸液體積的檢測試劑，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育2-6小時，培養(yǎng) 基的顏色由靛青藍(lán)開始變成粉紅色就可以進入下一步。

 2. 推薦使用熒光酶標(biāo)儀進行檢測，激發(fā)光波長在530-560 nm之間，發(fā)射光波長為590 nm， 記錄相對熒光單位（RFU）。 

3. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或細(xì)胞生長曲線：縱座標(biāo)（Y 軸）為相對熒光單位（RFU）；橫坐標(biāo)（X 軸）為細(xì)胞數(shù)或時間點或藥物濃度。

 注意事項 ：

1. 合適密度的細(xì)胞可以增加檢測靈敏度。對于96孔板，我們建議每孔接種100μl細(xì)胞，細(xì) 胞濃度范圍為：貼壁細(xì)胞在100-10,000/孔，懸浮細(xì)胞在2,000-50,000/孔，并以培養(yǎng)基為 空白對照。對于384孔板，細(xì)胞濃度和接種量均減半。 

2. 整個過程均應(yīng)為無菌操作，因為微生物污染物同樣可以還原檢測試劑而影響實驗結(jié)果。 

3. 注意接種細(xì)胞濃度和加入檢測試劑后孵育時間。細(xì)胞濃度過高或孵育時間過長，會導(dǎo)致 繼發(fā)性還原反應(yīng)，產(chǎn)生無色和熒光消失。

 4. 孵育時，須避光。 

5. 可以使用熒光或分光光度檢測，但熒光的靈敏度高，實驗誤差小，推薦使用熒光檢測。