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博奧龍-佐劑-弗氏佐劑-新型乳劑-抗體制備

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更新時(shí)間:2023-06-20 07:44:09瀏覽次數(shù):173次

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博奧龍-佐劑-弗氏佐劑-新型乳劑-抗體制備是一種新型油包 水佐劑,用于免疫小鼠和家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以制備單、多克隆抗體。該佐劑以弗氏不佐劑為基礎(chǔ),添加了多種具有強(qiáng)免疫刺激活性的TLR配體。

博奧龍-佐劑-弗氏佐劑-新型乳劑-抗體制備

新型乳劑

    貨號(hào):KX0210049

    規(guī)格:1ml

     博奧龍-佐劑-弗氏佐劑-新型乳劑-抗體制備 是一種新型油包 水佐劑,用于免疫小鼠和家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以制備單、 多克隆抗體。

    該佐劑以弗氏不佐劑為基礎(chǔ),添加了多種具有強(qiáng)免疫刺激活性的TLR配體。 

    新型佐劑與常規(guī)使用的弗氏佐劑相比,具有以下特點(diǎn):


    (1) 新型乳劑活性強(qiáng)于弗氏不佐劑;

    (2)與 弗氏佐劑不同,不含有干擾免疫應(yīng)答的無(wú)關(guān)蛋白成分;

    (3)安全性好,副反應(yīng)率低;

    (4)免疫針次少、抗原用量低等多方面特點(diǎn)。


    二、 博奧龍-佐劑-弗氏佐劑-新型乳劑-抗體制備 的使用方法
       
     

    1.  用生理鹽水將抗原稀釋到2倍最終濃度(按小鼠每針次50μl、家兔每針次100μl用量配制)。

        備注:推薦使用的抗原用量為小鼠每針次10-20μg、家兔每針次20-50μg。


    2.  用振蕩器充分混勻佐劑,無(wú)菌條件下取出所需用量(按小鼠每針次50μl、家兔每針次100μl)與抗原按體積比1:1混合,并用振蕩器劇烈振蕩5-10min,直至靜止放置10min水油相不分層。

        備注:與抗原混合前佐劑分層屬正常現(xiàn)象,但必須充分混勻后才能取用。


    3.  通過(guò)皮下或肌肉單點(diǎn)注射免疫動(dòng)物,小鼠每針次100μl,家兔每針次200μl。
       
    (1)佐劑與抗原混合后應(yīng)盡快注射,若放置時(shí)間較長(zhǎng)出現(xiàn)水油相分層,則必須按上述步驟2重新振蕩混勻;

    (2)抽入針管前應(yīng)搖勻,抽入針管后應(yīng)盡快注射;

    (3)盡量選擇引流淋巴結(jié)附近(如腋窩和腹股溝附近)的皮下或肌肉進(jìn)行免疫。

    4.  第21天按同樣方式加強(qiáng)免疫1針。備注:每次佐劑和抗原現(xiàn)配現(xiàn)用。

    5.  第35天采微量血進(jìn)行 ELISA測(cè)定, 抗體滴度應(yīng)在1:10000-1:范圍內(nèi),隨后即可采全血或按常規(guī)方法進(jìn)行抗原沖擊免疫和脾細(xì)胞融合。

    6.  若抗體滴度沒(méi)有達(dá)到要求,可在第42天按同樣方式加強(qiáng)免疫1針。

        備注:通常情況下小鼠只需免疫2針,而家兔往往需要免疫3針。


    7.  若免疫3針,可在第52-56天采微量血進(jìn)行ELISA測(cè)定, 抗體滴度應(yīng)在1:10000-1:1000000范圍內(nèi),隨后即可采全血或按常規(guī)方法進(jìn)行抗原沖擊免疫和脾細(xì)胞融合。

         備注:佐劑免疫效果有時(shí)也與抗原特性有關(guān),若免疫3針后仍達(dá)不到要求,不建議進(jìn)行更多針次免疫。

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