分光光度計是一類很重要的分析儀器，無論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域，還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門，都有廣泛而重要的應(yīng)用。紫外可見分光光度計是基于紫外可見分光光度法原理，利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)行分析的一種分析儀器。
紫外可見分光光計在條件設(shè)定時需注意的四個事項：
(1)狹縫寬度
狹縫的寬度太大，入射光的單色性差狹縫的寬度太小，入射光的強度變?nèi)酢?狹縫寬度過大或過小會降低靈敏度，但選擇誤差小時的大狹縫。 一般的選擇設(shè)備的狹縫寬度琵琶度必須小于測量對象樣品的吸收帶的半值寬度。 否則測量的吸光度值會變低。 狹縫寬度的選擇在減少狹縫寬度時供試品的吸光度消失。 除此之外，對于大部分被測量品種，可以使用2nm的縫制寬度。
(2)測定波長
在定量分析中，為了提高測定靈敏度，入射光的波長選擇被測定物的大吸收波長max，如果max有干擾，則可以選擇另外一個靈敏度稍低但避免干擾的譜線，因此通過適當(dāng)選擇入射光的波長，提高測定的靈敏度，
(3)空白溶液的選擇
空白溶液是用于調(diào)節(jié)吸光度測定的動作零點即A=0、T=99%的溶液，用于消除溶液中的其他基質(zhì)成分、吸收單元和溶劑對入射光的反射和吸收所帶來的誤差。 根據(jù)情況，常用空白溶液有以下選擇。
只有溶劑空白溶液中的測定對象成分被測定波長吸收，其他成分不被吸收時，可以用純?nèi)軇┛瞻住?/span>
試劑空白顯色劑和其他試劑被吸收，被檢體溶液不被吸收時，用不添加被檢成分的其他試劑空白。
試樣空白試樣基體有吸收，顯色劑和其他試劑沒有吸收時，用不添加顯色劑的試樣溶液空白。
(4)控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶?/span>
通過控制被測量物的濃度、改變吸收單元的厚度，可以實現(xiàn)吸光度的適當(dāng)范圍，盡可能減小測量誤差。 一般吸光度需控制在0.1-0.8的范圍內(nèi)。
