BD FACSAria™ Fusion 流式細(xì)胞儀具有的多色性能，操作簡單。早在2003年BD FACSAria™ 問世。如今，其杰出的分選性能和生物安方案結(jié)合。BA FACSAria™ Fusion配備的生物安全柜可以保護(hù)實(shí)驗(yàn)樣本以及操作者的安全，而這，也正是生物安全的國際標(biāo)準(zhǔn)。

概述

集安全、高性能、分選于一體

BD FACSAria Fusion所配的生物安全柜嚴(yán)格按照Class II Type A2生物安全等級設(shè)計，符合美國國家衛(wèi)生基金會InternationalStandard 49、歐洲European Standard 12469和澳大利亞Australian Standard AS 2252.2–2009等一系列國際生物安全標(biāo)準(zhǔn)。同時，BD FACSAria Fusion還提供不帶生物安全柜的配置，并可以在以后需要的時候很方便的現(xiàn)場升級安裝。

為了進(jìn)一步提高生物安全防護(hù)，BD FACSAria Fusion 采用了諸多雙重保險設(shè)計，將操作者可能受到的暴露風(fēng)險減少至。例如，在生物安全柜保護(hù)操作者免受分選產(chǎn)生的氣溶膠危害的同時，一個內(nèi)置的氣溶膠控制系統(tǒng)（AMS）可以幫助排除氣溶膠，而且AMS與生物安全柜獨(dú)立工作，更加提高了生物安全性。

為了達(dá)到無以倫比的靈敏度和分辨率，BDFACSAria Fustion設(shè)計了精確集成的液流系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)，以達(dá)到的信號檢測。在多色實(shí)驗(yàn)中，優(yōu)化的光纖引導(dǎo)的激光使每個熒光通道的檢測靈敏度和分辨率得到進(jìn)一步提升。的流動室技術(shù)和光膠耦合石英杯確保了高性能、高安全性和高簡便性。BD FACSAria Fusion使原本復(fù)雜的細(xì)胞分選實(shí)驗(yàn)變得很簡單，從而服務(wù)于更多的研究者和應(yīng)用領(lǐng)域。

液流系統(tǒng)

高靈敏度的多色分析和分選應(yīng)用

從穩(wěn)定性流動室技術(shù)到穩(wěn)定性光路設(shè)計，再到軟件操控的儀器設(shè)置和操作， BD FACSAria Fusion實(shí)現(xiàn)了簡單高效的細(xì)胞分析和分選。

光膠耦合的石英杯流動室

BD FACSAria Fusion的核心是的新一代方形石英杯流動室，它與激光器、光膠耦合的熒光收集光路一起構(gòu)成了一套真正意義的穩(wěn)定性光路系統(tǒng)。BD的石英杯設(shè)計確保激光精確聚焦到樣本流上，不僅能使樣本能獲得的激發(fā)效率，同時還能使發(fā)射光信號得到的收集。

穩(wěn)定性光路不但大大縮短了開機(jī)啟動時間，也提高了實(shí)驗(yàn)間以及不同操作者間的可重復(fù)性，并且實(shí)現(xiàn)了每日質(zhì)控的自動化。更重要的是，它還提高了熒光收集效率并優(yōu)化了分辨率，因此特別適合多色應(yīng)用的需求，甚至在高速分選時同樣具有高靈敏度和分辨率。

此外，BD FACSAria Fusion的新一代流動室設(shè)計進(jìn)一步提高了側(cè)群細(xì)胞 (SP) 應(yīng)用和細(xì)胞DNA周期分析實(shí)驗(yàn)的分辨率。

高性能分析，高性能分選

BD FACSAria Fusion的分析性能和熒光檢測靈敏度比肩水平的專業(yè)分析型儀器。這是因?yàn)槠溥\(yùn)用了與BD FACSCanto™、BD FACSVerse™以及BD LSRFortessa™相同的光膠耦合石英杯和穩(wěn)定性的光路結(jié)構(gòu)。

這種流動池和噴嘴的設(shè)計可以達(dá)到高數(shù)值孔徑的光信號收集。細(xì)胞或顆粒以低速通過分析區(qū)域以便收集更多的光信號，之后包裹著細(xì)胞或顆粒的液流在通過噴嘴后加速，從而確保高性能細(xì)胞分選的實(shí)現(xiàn)。

在傳統(tǒng)的空氣激發(fā)系統(tǒng)中，對顆粒進(jìn)行分析和分選時的速度是相同的，與之相比，具備了精密配合的光學(xué)和液流系統(tǒng)的BD FACS Fusion表現(xiàn)出更*的光學(xué)檢測靈敏度。

更好的生物安全保障

穩(wěn)定性光路以及軟件操控的設(shè)計減少了操作者與儀器之間直接接觸的頻率，這也為操作者提供了更好的生物安全保障。

高靈敏檢測弱表達(dá)細(xì)胞群

BD FACSAria Fusion對于光學(xué)系統(tǒng)的不斷改進(jìn)將熒光檢測靈敏度提高到的水平。專門為優(yōu)化信噪比而選擇的全新激光器進(jìn)一步提高了對弱表達(dá)細(xì)胞群的檢測分辨率，確保目標(biāo)細(xì)胞分選時圈門更加便捷、準(zhǔn)確。新激光器的優(yōu)異性能使得弱表達(dá)細(xì)胞群發(fā)出更亮的熒光，從而便于被分析及后續(xù)的圈門分選。

適應(yīng)不同大小顆粒的噴嘴

不同尺寸的噴嘴使用戶可以分選不同大小的樣本顆粒。噴嘴有四種尺寸可選：70μm、85μm、100μm和130μm。噴嘴位于細(xì)胞被激光激發(fā)的下方，更換更為方便，安裝位置精確，不會發(fā)生偏差。這意味著在每次插入噴嘴后，可以得到可重復(fù)的液滴形態(tài)，不需要重新調(diào)節(jié)儀器設(shè)置，使儀器具有可重復(fù)的設(shè)置和校正狀態(tài)。軟件中包括了不同噴嘴的特異分選設(shè)置，使壓力及分選設(shè)置與使用的噴嘴相匹配。

BD FACS™ Accudrop 技術(shù)讓液滴延遲的計算變得簡單

BD FACS Accudrop技術(shù)簡化了跌落延遲測定

BD FACS™ Accudrop技術(shù)幫助用戶查看的下降延遲值。軟件自動化簡化了下降延遲的確定。一旦計算出下降延遲，系統(tǒng)會自動調(diào)整以保持一個恒定的中斷，稱為“點(diǎn)"。自動堵塞檢測停止分揀，并在檢測到堵塞時保護(hù)收集管。

經(jīng)過反應(yīng)杯后，氣流加速通過噴嘴，形成液滴進(jìn)行分選。由于粒子質(zhì)詢發(fā)生在噴嘴上方，因此可以在不重新調(diào)整光學(xué)元件或流體流的情況下插入和移除噴嘴。

BD FACSAria Fusion 的4個激光光斑 

方便的鞘液桶和廢液桶

鞘液桶，清洗液桶以及廢液桶都放在系統(tǒng)底部的一個抽屜里，易于操作。抽屜中包括10L不銹鋼鞘液桶和10L容積的廢液桶，鞘液桶可進(jìn)行高壓。另外，抽屜中還有3個5L的輔助清潔液桶，用于自動無菌分選液路的處理和儀器關(guān)機(jī)。

BD FACSAria Fusion可以連接實(shí)驗(yàn)室的空氣過濾和干燥系統(tǒng)，也可以選配壓縮機(jī)。

樣本進(jìn)樣倉

在樣本采集期間，進(jìn)樣倉被加壓，使樣本進(jìn)入石英杯檢測流動室。樣本進(jìn)樣倉的溫度控制和混勻功能都可以用BD FACSDiva™軟件進(jìn)行調(diào)節(jié)，從而保證長時間分選時細(xì)胞的活性，并持續(xù)細(xì)胞的懸浮混勻狀態(tài)。該系統(tǒng)提供從1.0 mL的微量管至15 mL的離心管等多種上樣管固定架。進(jìn)樣端可安裝35 μm和50 μm的樣本濾器，可以在分析和分選過程中避免管路堵塞。

從分選裝置到收集倉

從樣本進(jìn)樣倉直至分選收集管的封閉管道能夠分離氣溶膠，并且通過液體抽吸裝置抽空分選裝置中的氣溶膠。分選裝置設(shè)計成為固定位置的電偏轉(zhuǎn)板，能夠?qū)?xì)胞進(jìn)行更高效和重復(fù)更好的定向偏轉(zhuǎn)，并準(zhǔn)確進(jìn)入特定的分選收集裝置。

分選倉內(nèi)安裝有一個抽吸裝置抽屜，能夠在在分選開始前遮蔽分選收集管，并在Sweet Spot軟件監(jiān)測到堵塞發(fā)生時自動關(guān)閉，以保護(hù)樣品收集管和其中的樣品。

分選收集倉的結(jié)構(gòu)設(shè)計使得放入樣品收集管基座變得十分方便。收集管基座的設(shè)計能夠保證收集管的無菌狀態(tài)。你還可以選配一個溫度控制裝置，用以控制樣品收集管或玻片或多孔板的溫度。

方便的無菌設(shè)置和清洗程序

液流系統(tǒng)的創(chuàng)新，如易于插拔的噴嘴，自動化的分選設(shè)置，易于更換的濾膜等，使儀器設(shè)置更為方便和快捷。一體化閥門組合形成了全新的液流管路。軟件向?qū)篃o菌分選設(shè)置更簡便和高效。此外，在樣本運(yùn)行后，樣本進(jìn)樣針內(nèi)外都會自動進(jìn)行沖洗，避免殘留消并除樣本間的交叉污染。

光學(xué)系統(tǒng)

更高效率的多色檢測

BD的在光學(xué)系統(tǒng)方面的革新設(shè)計能有效的檢測信號，并在多色檢測中極大的提高每個通道的靈敏度和分辨率。增強(qiáng)的靈敏度和分辨率意味著即便信號很弱的細(xì)胞群也可以輕易地被識別和分選。

光學(xué)系統(tǒng)方便優(yōu)化多色檢測和抗體組合的設(shè)計，以求達(dá)到結(jié)果。用戶可以選擇照射樣本細(xì)胞的激發(fā)光波長，以及引導(dǎo)散射光和熒光信號通過特定的濾光片到達(dá)檢測器的收集光路。激發(fā)光和收集光路上的創(chuàng)新設(shè)計在減小激發(fā)光損失的同時，也顯著改善了信號收集效率，從而使每個樣本都能獲取得到良好的信號。

激發(fā)光路

激發(fā)光路的組成包括：多根引導(dǎo)光纖、固定波長的激光、光束整形裝置和消色差聚焦透鏡。各激光聚焦形成的光斑在空間上相互分離，并各自聚焦成形 (9 x 65 微米)。光斑聚焦越集中，熒光標(biāo)記的微粒通過激發(fā)點(diǎn)時產(chǎn)生的信號就越強(qiáng)。光膠耦合的熒光透鏡能限度的將發(fā)射光從檢測點(diǎn)傳遞給熒光收集光路。由于光路和樣本流均固定，儀器光路的正交在不同實(shí)驗(yàn)、不同日期間一直保持不變。 手動調(diào)校光路會因?yàn)槊看握{(diào)校狀態(tài)不同而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果有變化。而固定光路設(shè)計避免了這種問題，保證儀器光路穩(wěn)定，對實(shí)驗(yàn)結(jié)果不會有影響。

八角形檢測器中的光傳播路徑

固定光路保證了實(shí)驗(yàn)中不會因光路人為調(diào)整而引入的誤差。

收集光路

光纖將發(fā)射光從光膠耦合石英杯傳遞給檢測器接收裝置?；诎私切魏腿切卧O(shè)計的收集光路，能限度的檢測來自每個激光束照射點(diǎn)的信號，其原理是讓波長最長的光 (光子能力)優(yōu)先透射進(jìn)入個光電倍增管 (PMT)，并通過一系列的長通二色分光鏡將較短波長的光反射到下一個PMT檢測器。

這一設(shè)計是根據(jù)光反射比光透射更有效率這一原理。熒光信號以反射的形式傳播到每一個PMT檢測器，并在到達(dá)檢測器之前只通過2個濾片。因此可以在光信號損失最小的情況下完成熒光檢測。

裝置在每個PMT檢測器之前的帶通濾鏡允許波長范圍內(nèi)的熒光被收集。更重要的是，這種排列簡化了光學(xué)陣列中濾鏡和分光鏡，濾光片更易更換，而且不需要任何校準(zhǔn)就可達(dá)到良好的信號強(qiáng)度。

精密的光學(xué)設(shè)計

BD FACSAria Fusion光學(xué)系統(tǒng)方面的諸多革新設(shè)計，例如的光膠耦合石英杯、八角形檢測器和9 x 65?m大小的光斑，這些革新設(shè)計協(xié)同工作，以限度提高檢測靈敏度和分辨率。通過精密的設(shè)計產(chǎn)生出這樣一套更高效的光學(xué)系統(tǒng)，使得其能夠使用較低功率激光，無需通過單純提高激光器的功率來提升實(shí)驗(yàn)靈敏度和分辨率。而低功率激光又同時可以降低儀器運(yùn)作的總體費(fèi)用。

滿足當(dāng)前及未來需求

對于許多用戶而言，一臺流式的性能高低取決于其靈活性，而靈活性主要表現(xiàn)在能夠同時檢測的參數(shù)數(shù)量。BD FACSAria Fusion 可以支持六根激光器和四個獨(dú)立光斑。選擇多達(dá)六根不同波長的激光器，并具有同時進(jìn)行多達(dá)20個參數(shù)，18色的檢測能力，有著強(qiáng)大的靈活性。

可升級并向下兼容

用戶可以根據(jù)當(dāng)前和未來的需求以及預(yù)算情況來配置儀器。以后還可以通過升級服務(wù)來增加 BD FACSAria Fusion 的激光器數(shù)量，以提升其能力。

更低的使用成本

與空氣中激發(fā)得分選方式相比，BD FACSAria Fusion高效的光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計使得使用成本降低。BD FACSAria Fusion 通過光纖來傳導(dǎo)固體激光器所發(fā)出的激光，從而實(shí)現(xiàn)了靈敏度和分辨率的。

小顆粒的分辨率

0.3-µm，0.4-µm，0.5-µm，1.0-µm大小的微球在同一管中用 BD FACSAria Fusion 檢測，四個群體都可以和背景信號清楚地區(qū)分。

CFP轉(zhuǎn)染的Hela細(xì)胞

BD FACSAria Fusion 上可以配備445nm激光，它比405nm激光能更有效地激發(fā)CFP蛋白。CFP轉(zhuǎn)染的Hela細(xì)胞可以用445nm和405nm的激光激發(fā)，445nm激發(fā)得到的區(qū)分度明顯要高很多。

BD FACSAria III 上收集的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

小鼠骨髓SP細(xì)胞

小鼠骨髓來源的細(xì)胞用 Hoechst 33342, c-Kit, Sca-1, 和lineage標(biāo)記，在裝有375nm激光器的 BD FACSAria III上采集數(shù)據(jù)。BD FACSAria Fusion 上同樣可以配備這根激光器。

SP群體 (紅色) 全是c-Kit+ Sca-1++。

使用的抗體是c-Kit PE, Sca-1 PE-Cy™7, Lineage FITC, CD 34 APC, CD45 APC-Cy7, PI，Hoechst Blue, 和 Hoechst Red。

BD FACSAria III 上收集的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

腫瘤細(xì)胞株的SP細(xì)胞

如散點(diǎn)圖顯示人HT-29結(jié)腸癌細(xì)胞使用Hoechst 33342染色，裝有375nm激光器的BD FACSAria III上采集數(shù)據(jù)。BD FACSAria Fusion 上同樣可以配備這根激光器。

作為對照樣本，SP表達(dá)被抑制。

BD FACSAria III 上收集的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

控制與分析

與其他BD流式細(xì)胞分析儀和分選儀兼容

BD FACSAria Fusion 使用 BD FACSDiva 軟件，對儀器設(shè)置、數(shù)據(jù)獲取和數(shù)據(jù)分析都能夠提供快捷有效的控制。軟件能自動完成儀器的主要設(shè)置過程，限度降低人與儀器的直接接觸所可能帶來的生物安全性的問題。

BD FACSDiva 軟件被廣泛地應(yīng)用于一系列BD的流式細(xì)胞分析和分選儀，包括 BD FACSCanto 和 BD LSRFortessa 系統(tǒng)等。研究者的實(shí)驗(yàn)設(shè)計更為靈活方便，可以將優(yōu)化好的實(shí)驗(yàn)條件和設(shè)置快速的轉(zhuǎn)移到另一平臺上。例如，分析實(shí)驗(yàn)的條件和設(shè)置可以輕松應(yīng)用于分選實(shí)驗(yàn)。

分選前的快速簡單準(zhǔn)備:
1.打開
2.開啟液流
3.自動化完成儀器設(shè)置、質(zhì)控
     以及液滴延遲優(yōu)化
4.化樣品條件
5. 分選樣本

BD FACSDiva軟件具有儀器設(shè)置和追蹤 (CS&T) 功能，能夠幫助儀器完成基線設(shè)置，優(yōu)化儀器的靈敏度和熒光分辨率。因此，BD FACSDiva能大幅減少由于操作失誤，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致穩(wěn)定。它使得用戶可以在儀器連續(xù)穩(wěn)定的前提下快速完成特定實(shí)驗(yàn)的條件設(shè)置。儀器狀態(tài)追蹤功能會監(jiān)測一系列儀器設(shè)置的數(shù)值，并給出狀態(tài)報告，大大簡化了日常質(zhì)控的流程。Levey-Jennings圖譜可以幫助用戶了解他們的儀器狀態(tài)，確定是否需要進(jìn)一步的維護(hù)處理。

BD CS&T 軟件系統(tǒng)

數(shù)據(jù)獲取和分析

BD FACSDiva軟件使得科研工作者能夠使用自動的數(shù)據(jù)獲取流程，去完成多個數(shù)據(jù)的預(yù)覽和保存。軟件還能夠管理數(shù)據(jù)獲取模板、實(shí)驗(yàn)界面設(shè)計、以及補(bǔ)償程序，從而方便數(shù)據(jù)獲取。

為了高效便捷的分析，軟件提供了自動設(shè)門方式、用戶可選的圖形結(jié)構(gòu)和批處理功能。存儲的數(shù)據(jù)可以通過圖形、門、群體層級以及統(tǒng)計結(jié)果，在同一張BD FACSDiva工作表上實(shí)現(xiàn)完整分析。通用工作表被保存后，可以用來分析同一實(shí)驗(yàn)中的多個樣本管數(shù)據(jù)，從而大大節(jié)省時間。有助于提高效率的方式還有：用戶自定義的批處理分析、自動化的設(shè)門調(diào)整、在分析不同數(shù)據(jù)間暫停、輸出統(tǒng)計結(jié)果、在進(jìn)到下一個數(shù)據(jù)文件前打印結(jié)果等等。

索引分選

索引分選使得分選細(xì)胞到一個多維收集裝置如96孔板之后，每一個位置上的細(xì)胞表型是可以再回溯的。每個細(xì)胞落在收集裝置上的位置信息是以X/Y兩維的數(shù)據(jù)形式被保存下來的。因此在分選后，收集裝置上的特定位置的細(xì)胞可以追蹤其流式表型信息。

數(shù)字化電子系統(tǒng)

光膠耦合的石英杯流動室和電子處理系統(tǒng)協(xié)同作用可以使每個檢測顆粒的信息。電子采樣速率和顆粒在流動室中的流動速度精確匹配。BD FACSAria Fusion每秒70,000個顆粒的上樣速度下，采集到的數(shù)據(jù)量和上樣速度線性相關(guān)，并且結(jié)果精確。

BD FACSAria Fusion 系統(tǒng)采樣速度

安全防護(hù)

BD與Baker共同設(shè)計的安全柜，符合生物安全標(biāo)準(zhǔn)且節(jié)省空間

流式細(xì)胞術(shù)生物安全正在成為越來越多的重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的要求，他們非常關(guān)注操作者偶然暴露在生物樣本中的潛在危險。BD公司于Baker公司合力設(shè)計并建立了一個強(qiáng)大且具有前瞻性的生物安全方案。

在購買BD FACSAria Fusion時，您可以選擇搭配或者不搭配生物安全柜 (BSC)。因?yàn)锽D FACSAria Fusion與BSC的銜接嚴(yán)絲合縫，如果將來需要安裝BSC，現(xiàn)場升級安裝將在一天之內(nèi)完成。

Available without the biosafety cabinet

BD FACSAria Fusion可不選配BSC系統(tǒng)，在日后可快速現(xiàn)場升級安裝。即使BD FACSAria Fusion沒有配備BSC，密閉的上樣至分選的整個通路、液流吸引器、選配的AMS也能降低操作員暴露的危險。

對人員、樣本及環(huán)境的保護(hù)

BSC用來保護(hù)操作者免受樣本中生物試劑的污染威脅。在與傳染性樣本相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室中，BSC是高效、常用的一級屏障設(shè)備中的一員。BSC保護(hù)員工和環(huán)境免受有害試劑的傷害，保護(hù)樣品 (細(xì)胞) 不被污染。

生物安全柜可以控制控制氣流的方向，流量和速度，避免可能有害的顆粒接觸操作著。

生物安全標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證

Baker公司認(rèn)證為BD FACSAria Fusion定制的生物安全柜符合二級A2型生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)和美國衛(wèi)生設(shè)備基金會 (NSF) 49號國際標(biāo)準(zhǔn)。該生物安全柜同時符合歐洲12469號標(biāo)準(zhǔn)和澳大利亞AS 2252.2–2009號標(biāo)準(zhǔn)。所有的微生物實(shí)驗(yàn)都是在集成系統(tǒng)上進(jìn)行，以確保與使用狀態(tài)相同

氣流控制

BSC通過控制氣流的方向、體積和流速來引導(dǎo)潛在有害顆粒遠(yuǎn)離操作者。空氣經(jīng)過過濾后循環(huán)流動于工作站表層，安全柜前方的獨(dú)立氣流在操作者與工作站之間產(chǎn)生一道保護(hù)屏障。

高效微粒過濾器 (HEPA) 能夠去除空氣中的微生物和空氣微粒 (氣溶膠)。HEPA過濾器位于工作區(qū)域的空氣入口和出口處。在安全柜消耗和補(bǔ)充空氣的位置也安裝了HEPA過濾器。安全柜中的HEPA過濾器可排除至少99.97%的熱生成DOP煙塵顆?；蛘咧睆?.3um以上的顆粒。

BD FACSAria Fusion的氣溶膠處理系統(tǒng)

BD FACSAria Fusion具有一套多重保護(hù)控制的氣溶膠處理系統(tǒng)。BD FACSAria Fusion整合的二級A2安全柜確保氣溶膠不外泄，并立即通過HEPA被吸入BSC的過濾器中。

為了更好地處理氣溶膠，獨(dú)立的氣溶膠處理系統(tǒng)(AMS) 迅速將分選倉中的氣溶膠吸出，并將所有微粒捕獲于專用的AMS HEPA過濾器中。

另外，氣溶膠處理系統(tǒng)也連接至分選倉區(qū)域。從上樣倉至分選收集管的整個密閉通路都可以分離、捕獲氣溶膠。氣溶膠顆粒將會被液流吸引器吸出，或者被AMS高效抽走。

多重保護(hù)正在成為生物安全防護(hù)的重要一環(huán)。有了BD FACSAria Fusion，從上樣到分選的整個密閉通路、液流吸引器、二級A2生物安全柜以及氣溶膠控制系統(tǒng)，使氣溶膠控制系統(tǒng)高度盈余。由于這些系統(tǒng)是相互獨(dú)立的，使得我們可以逐個測試，保證工作狀態(tài)和保證具有備用保護(hù)功能。

多色組合

在BD FACSAria Fusion 流式細(xì)胞儀上進(jìn)行10色CD4、CD8記憶和效應(yīng)細(xì)胞與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞檢測方案。T亞群的檢測分析可以輕松實(shí)現(xiàn)。