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MUG 4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸

參   考   價(jià): ¥ 1780

訂  貨  量: ≥1 套

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產(chǎn)品型號(hào):S2705 -1g

品       牌:

廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:南京市

更新時(shí)間:2020-03-09 10:44:48瀏覽次數(shù):225

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級(jí)別 超純、高純
細(xì)菌的葡萄糖醛酸苷酶在堿性條件下,作用于4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide簡(jiǎn)稱(chēng)MUG)的β糖醛酸苷鍵,使其水解,釋放的4-甲基傘形酮在366nm紫外燈下產(chǎn)生藍(lán)白色熒光。97%的大腸埃希氏桿菌、10%的沙門(mén)氏菌以及少量的志賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。

GUS報(bào)導(dǎo)基因的定量檢測(cè)

GUS 能與底物MUG(分子量352.3,4-甲基傘型酮-β-葡萄糖醛酸苷,4-methylumbelliferylβ-D-glucuronide)反應(yīng)產(chǎn)生熒光物質(zhì)MU(分子量198.2,4-甲基傘型酮,4-methylumbelliferone)。MU的激發(fā)波長(zhǎng)為365nm,發(fā)射波長(zhǎng)為456,其含量可由熒光分光光度計(jì)測(cè)出。因此,我們可以根據(jù)單位質(zhì)量的植物總蛋白在單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的熒光物質(zhì)的多少來(lái)定量的檢測(cè)GUS含量。

2.1 試劑配制

1)   1mol/L Na2HPO4溶液:35.814g Na2HPO4溶于100ml水。

2)   1mol/L NaH2PO4 溶液:15.601g NaH2PO4 溶于100ml水。

3)   0.1M 磷酸緩沖液(PH7.0):1mol/L Na2HPO4取5.77ml,1mol/L NaH2PO4取4.23ml,定容至100ml。

4)   10% SDS溶液:將90ml水稍微加熱,加10g SDS,攪拌溶解,加入幾滴濃鹽酸調(diào)節(jié)PH至7.2,然后加水定容至100ml。

5)   0.5 M EDTA (PH8.0):在80ml水中加入18.61g Na2EDTA•2H2O,用NaOH調(diào)PH至8.0(約需2g左右的固體NaOH),溶解后定容至100ml。

6)   GUS酶提取液:0.1M 磷酸緩沖液(PH7.0)取50ml;10% SDS取1ml; 0.5M EDTA(PH8.0)取2ml; Triton X-100取100ul;β-巰基乙醇100ul;用水定容至100ml。

7)   MUG底物:稱(chēng)8.8mg MUG,溶于10ml GUS酶提取液中,配制成2mmol/L的工作濃度。

8)   反應(yīng)終止液(0.2 mol/L Na2CO3 ):稱(chēng)2.12Na2CO3 ,用水定容到100ml。

9)   考馬斯亮藍(lán)G250溶液:考馬斯亮藍(lán)G250 10mg, 95%乙醇5m1, H3PO4 10ml,定容至l00ml,過(guò)濾后4℃保存。

10) 1mg/ml BSA:20mg BSA,用GUS提取緩沖液定容至20ml。

相關(guān)產(chǎn)品:

貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

價(jià)格

M0461-100mg

X-Gluc

100mg

480

M0461-1g

X-Gluc

1g

1800

M1397

IPTG  

10g

419

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