CellSorter單細(xì)胞分選系統(tǒng)
背景：
通常情況下，分子生物學(xué)研究都是針對組織樣本或者一個細(xì)胞群來進(jìn)行。然而，組織樣本中一般包含多種類型的細(xì)胞，即使來自于同一個細(xì)胞群的各個細(xì)胞間的基因水平、表達(dá)水平會存在不同程度的差異，互為異質(zhì)細(xì)胞。以組織或細(xì)胞群為起始樣本的研究，可能會因為細(xì)胞異質(zhì)性而獲得錯誤的結(jié)果。以腫瘤發(fā)生為例，腫瘤的發(fā)生是單細(xì)胞中多種突變積累演化的結(jié)果，一個腫瘤組織中往往會包含處于不同階段的腫瘤細(xì)胞甚至前腫瘤細(xì)胞。采取組織樣本進(jìn)行研究，稀有卻重要的基因突變很可能淹沒在背景數(shù)據(jù)中，而采用單細(xì)胞進(jìn)行實驗則可避免上述的情況出現(xiàn)，獲得更可靠更有意義的結(jié)果。
單細(xì)胞實驗在腫瘤、干細(xì)胞、神經(jīng)、生殖、微生物學(xué)等多個領(lǐng)域以及法醫(yī)學(xué)中應(yīng)用廣泛，主要是基于以下特點(diǎn)：
單細(xì)胞亦包含一個物種全部的遺傳信息；
單細(xì)胞實驗避免了細(xì)胞異質(zhì)性的干擾，準(zhǔn)確性更高。
單細(xì)胞實驗有利于還原生物事件本身，諸多生物事件如胚胎發(fā)育、腫瘤形成及轉(zhuǎn)移等均以單細(xì)胞為起點(diǎn)。
概述
匈牙利Cellsorter公司推出的單細(xì)胞獲取平臺為獲取單細(xì)胞提供了完整的解決方案—全自動 Cellsorter單細(xì)胞分選系統(tǒng)。
Cellsorter可從血液、骨髓、制備的組織細(xì)胞懸浮等液態(tài)體系中挑選出感興趣的單細(xì)胞
CellSorter單細(xì)胞分選系統(tǒng)以顯微鏡為基礎(chǔ)，采用毛細(xì)管技術(shù)從少量樣本中分離單細(xì)胞和稀有細(xì)胞的自動細(xì)胞分選系統(tǒng)，操作步驟是由軟件控制。
整個過程分為三個步驟：
1．細(xì)胞識別
2．細(xì)胞獲取
3．細(xì)胞沉積
該系統(tǒng)是一種安裝在正常倒置顯微鏡上的計算機(jī)控制的微量吸管系統(tǒng)，精準(zhǔn)量化細(xì)胞形變、細(xì)胞間粘附作用和細(xì)胞與基質(zhì)之間的粘附作用，可同步實現(xiàn)熒光觀測、單細(xì)胞捕獲、分選和分離和圖像視頻處理
一個可在已有顯微鏡上搭建的，可同步實驗吸吮加載、圖像視頻處理與熒光觀測的細(xì)胞力學(xué)裝置。可建立微管吸吮力學(xué)加載-熒光觀測耦合的分子-細(xì)胞動力學(xué)實時原位觀測系統(tǒng)。
單個細(xì)胞粘附力測定模式圖：
細(xì)胞與細(xì)胞之間粘附力測定模式圖：
通過施加負(fù)壓將細(xì)胞的一部分（或整體）吸入微管中,測量一定負(fù)壓吸吮作用下細(xì)胞的變形及其時間歷程或細(xì)胞粘附分離的臨界負(fù)壓來評價細(xì)胞的變形特性，同時記錄細(xì)胞的吸入量。
*圖像處理技術(shù)和力學(xué)模型，精準(zhǔn)量化測量細(xì)胞形變、細(xì)胞對之間的相互作用以及黏附特性、基質(zhì)附著細(xì)胞測定細(xì)胞硬度等力學(xué)特性。
壓電微管吸吮模塊：對樣品池內(nèi)細(xì)胞的捕獲、分選、吸吮和微操控；
集成倒置熒光相差顯微鏡：用于對所述細(xì)胞進(jìn)行熒光激發(fā)；
信號采集模塊：用于對微弱熒光信號的采集；
控制模塊：用于對微管吸吮和熒光采集同步觸發(fā)，并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理
應(yīng)用范圍：
1）計算機(jī)控制的自動化微吸管系統(tǒng)測定單細(xì)胞黏附力
2）計算機(jī)控制的自動化微吸管系統(tǒng)測定細(xì)胞與細(xì)胞之間的黏附力
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