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上海金穗生物科技有限公司

in vivo凋亡檢測(cè)

時(shí)間:2012-7-9閱讀:740
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若想要標(biāo)記凋亡細(xì)胞,只需靜脈注射此探針,讓其在體內(nèi)循環(huán)。當(dāng)探針遇上激活的caspase時(shí),反應(yīng)性的半*與caspase異源二聚體的大亞基之間形成不可逆的共價(jià)鍵。結(jié)合的探針保留在細(xì)胞內(nèi),直至細(xì)胞膜損傷,逐漸損失較大的蛋白。未結(jié)合的探針就會(huì)被動(dòng)物的循環(huán)系統(tǒng)快速清除,但會(huì)在肝臟中保留3-4小時(shí),并積累在膀胱和糞便中,直至排出。動(dòng)物體內(nèi)剩下的信號(hào)就是對(duì)caspase活性的直接測(cè)定。有了直接的in vivo標(biāo)記,探針才能真正代表實(shí)驗(yàn)條件所引起的凋亡,而不是組織的體外操作所引起的凋亡。
探針的活體使用對(duì)藥物測(cè)定研究很有價(jià)值,因?yàn)橥ㄟ^活體動(dòng)物的熒光成像可測(cè)定藥物反應(yīng)性所引起的凋亡水平升高或降低。凋亡水平的升高使得粘附的探針更多,因此熒光強(qiáng)度增加。此外,活體技術(shù)避免了從動(dòng)物上取出細(xì)胞和組織的需要,這會(huì)進(jìn)一步誘導(dǎo)凋亡。
DyLight 690和DyLight 747細(xì)胞凋亡體內(nèi)檢測(cè)試劑盒中的探針大約能夠注射10只小鼠,價(jià)格為4430元。賽默飛世爾也提供DyLight 690和DyLight 747體內(nèi)對(duì)照試劑,價(jià)格為2780元,也可以使用10次。索取資料
膜檢測(cè)
Sigma-Aldrich公司也推出了一款A(yù)po-TRACE體內(nèi)凋亡檢測(cè)試劑盒,不過是檢測(cè)凋亡中的膜變化。此款產(chǎn)品能實(shí)現(xiàn)凋亡細(xì)胞的體內(nèi)染色和Apo-TRACE累積的定量分析。
Apo-TRACE是一種無毒的有機(jī)小分子,屬于ApoSense™低分子量化合物家族中的一員。ApoSense化合物對(duì)膜電位改變和磷脂紊亂作出反應(yīng),這些也是早期凋亡的特征。一旦注入體內(nèi),化合物即可標(biāo)記凋亡細(xì)胞。Apo-TRACE化合物具有固有的熒光特性(328 nm激發(fā),563 nm發(fā)射),并在活體內(nèi)凋亡細(xì)胞的膜上積累。通過測(cè)定器官或組織中細(xì)胞上積累的熒光染料,即可定量評(píng)估凋亡細(xì)胞。由于大部分抗癌療法都通過誘導(dǎo)凋亡而起作用,故Apo-TRACE的染色可指示療法是否有效。

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