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上海金穗生物科技有限公司

抗乙酰*受體抗體檢測(cè)方法臨床意義

時(shí)間:2012-10-15閱讀:571
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  AChR抗體是否結(jié)合到了肌細(xì)胞AChR上,可用125I-α-BuTx標(biāo)記肌細(xì)胞抽提物以免疫沉淀法來(lái)檢測(cè),此方法同樣可以用來(lái)檢測(cè)患者血清中的抗AChR抗體。血清1—5/ll加入標(biāo)記的抽提物中室溫下2h或4~C過(guò)夜,5000rpm離心3分鐘取沉淀,經(jīng)離心洗滌2—3次,然后用丁計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)。用正常人血清做正常對(duì)照。a-BuTx以nmol為單位。Cut-off值各實(shí)驗(yàn)室不同,但是結(jié)果大于0.5nmol/L通常被認(rèn)為是陽(yáng)性。正常個(gè)體的值通常小于0.2nmol/L。

    重癥肌無(wú)力患者的AChR抗體主要是IgG型,以IgGl~I(xiàn)gG3為主,其他亞型的抗體少見(jiàn)。AChR抗體是高親和性、抗原特異性的,不能與基因工程合成的AChR肽段結(jié)合,反之抗變性AChR亞單位的抗體卻不與完整的分子結(jié)合。說(shuō)明抗體的反應(yīng)是直接針對(duì)完整的AChR分子。
    重癥肌無(wú)力的抗體來(lái)源仍不清楚,推測(cè)該疾病不同亞群病因不同。有人認(rèn)為與外來(lái)抗原發(fā)生交叉反應(yīng)產(chǎn)生的抗體不可能引起如此高的親和性,尤其是在抗AChR抗體結(jié)合的構(gòu)象相關(guān)性、異質(zhì)性和高特異性方面。故而推測(cè)用常規(guī)方法檢測(cè)到的AChR抗體是繼發(fā)于交叉反應(yīng)后的抗原表位擴(kuò)展而產(chǎn)生的次級(jí)抗體。
    15%典型獲得性重癥肌無(wú)力患者的血清檢測(cè)不到AChR抗體,但將他們的免疫球蛋白注入小鼠也會(huì)產(chǎn)生神經(jīng)肌肉傳遞的功能障礙。這些病例中自身抗體的性質(zhì)不明確。
    重癥肌無(wú)力是一個(gè)經(jīng)典的獲得性免疫性疾病??筛鶕?jù)他們的發(fā)病年齡、胸腺病理學(xué)與HLA的相關(guān)性、一般癥狀、抗AChR抗體(血清學(xué)陰性的MG)分為五大類(lèi)??傮w發(fā)病率大約是1/10 000。雖然年輕時(shí)出現(xiàn)癥狀的患者比例zui高,但出現(xiàn)癥狀時(shí)大于40歲的患者也很多。約15%的重癥肌無(wú)力患者僅眼肌受累,通常表現(xiàn)為復(fù)視和上眼瞼下垂,繼而發(fā)展為全身性的疾病,這些患者大多是血清學(xué)陰性。剩下的85%則可能出現(xiàn)眼肌功能障礙及全身癥狀。約15%患者合并胸腺瘤,這些患者通??笰ChR抗體和抗骨骼肌抗體陽(yáng)性。
    85%一90%的全身性重癥肌無(wú)力患者血清中的抗AChR抗體陽(yáng)性。某些疾病,例如,遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙、肌萎縮側(cè)索硬化、多發(fā)性肌炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、用*治療的類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和無(wú)MG表面的胸腺瘤患者可出現(xiàn)抗AChR抗體弱陽(yáng)性,通常與zui終發(fā)展成MG有關(guān)??笰ChR抗體的量在MG患者中變化很大,與疾病的嚴(yán)重程度無(wú)明確的相關(guān)性。然而在同一個(gè)體血清中抗體與疾病的臨床表現(xiàn)是很相關(guān)的。例如,比抗體滴度原始值降低50%以上時(shí)通常在臨床表現(xiàn)上有顯著改善。
    經(jīng)胎盤(pán)傳播的重癥肌無(wú)力比例不高,10%患有重病肌無(wú)力的孕婦,孩子出生后有一過(guò)性的新生兒型重癥肌無(wú)力。這類(lèi)病兒對(duì)抗*酯酶療法反應(yīng)較好,通常能在一個(gè)月內(nèi)隨著母親IgG的消失而緩解。
    AChR抗體陽(yáng)性是診斷重癥肌無(wú)力的重要指標(biāo),但陰性并不能排除診斷。胎兒型重癥肌無(wú)力可能是母體中產(chǎn)生了特異性的抗胎兒型AChR抗體,但母親卻不表現(xiàn)癥狀。由于A(yíng)ChR表面存在不同的抗原決定簇,賦予重癥肌無(wú)力患者血清中的抗體具有高親和性、異質(zhì)性的特點(diǎn)。在判斷檢測(cè)結(jié)果時(shí),有一個(gè)很重要的方面需要考慮,即由于A(yíng)ChR濃度的限制,目前的檢測(cè)方法只能檢測(cè)其高親和性的抗體。低親和性抗體可能與其他自身抗原或微生物抗原有交互反應(yīng),難以測(cè)定。因而,低親和性抗體的鑒定及其測(cè)定方法的建立將有助于目前"AChR抗體陰性”患者的診斷及治療。

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