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PCR法DNA探針標(biāo)記試劑盒原理及特點(diǎn):
PCR標(biāo)記的原理是用帶標(biāo)記的dNTP進(jìn)行PCR,zui后得到的PCR產(chǎn)物將帶有標(biāo)記,可以直接用于雜交試驗(yàn)。其原理示意圖如下:
PCR法制備DNA探針示意圖
本產(chǎn)品是在上述原理的基礎(chǔ)上開發(fā),它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式,本試劑盒提供經(jīng)過(guò)優(yōu)化的試劑,不需要用戶自己摸索。
2. 足夠10次50 uL體系的常規(guī)PCR(用于制備標(biāo)記反應(yīng)的模板和設(shè)置對(duì)照反應(yīng))和5次50 uL體系的標(biāo)記反應(yīng)。
3. 一次標(biāo)記可以得到ug級(jí)的雙鏈DNA探針或約700ng的單鏈DNA探針,足夠多次雜交實(shí)驗(yàn)用。
4. 既可用于制備雙鏈探針,也可以用于單鏈探針。
5. 90604A需自備含標(biāo)記核苷酸的dNTP, 90604B和90604C分別含*和地高辛標(biāo)記的底物。自備的標(biāo)記包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本產(chǎn)品得到的探針參入率一般為4-5%(每100個(gè)核苷酸中有4-5個(gè)將帶有非同位素標(biāo)記),有效降低了空間阻礙,檢測(cè)效果*。
7. 可以用于Southern 和Northern Blot、原位雜交、菌落和斑點(diǎn)印跡雜交等分析。
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