s1核酸酶
S1核酸酶來源于稻谷曲霉(Aspergillusoryzae),是一種高度單鏈特異的核酸內(nèi)切酶,在zui適的酶催反應(yīng)條件下,降解單鏈DNA或RNA,產(chǎn)生帶5,-磷酸的單核苷酸或寡核苷酸。對(duì)雙鏈DNA、雙鏈RNA和DNA-RNA雜交體相對(duì)不敏感。通常水解單鏈DNA的速率要比水解雙鏈DNA快75000倍。這種酶需要低水平的zn2+的激活,zui適pH范圍為4.0~4.3。一些螯合劑(如EDTA和檸檬酸等)能強(qiáng)烈地抑制s1核酸酶活性,此外磷酸緩沖液和0.6%左右的SDS溶液也可以抑制它的活性,但它對(duì)尿素以及甲酰胺等試劑則是穩(wěn)定的。S1核酸酶的單鏈水解功能可以作用于雙鏈核酸分子的單鏈區(qū),并從單鏈部位切斷核酸分子,而且這種單鏈區(qū)可以小到只有一個(gè)堿基對(duì)的程度。由于具備這種功能,使S1核酸酶在分析核酸雜交分子(RNA-DNA)的結(jié)構(gòu)、給RNA分子定位、測定真核基因中間隔子序列的位置、去除DNA片段中突出的單鏈尾,以及打開在雙鏈cDNA合成期間形成的發(fā)夾環(huán)。