細(xì)胞質(zhì)膜是由蛋白質(zhì)不同程度鑲嵌在脂雙層中所形成的動(dòng)態(tài)流動(dòng)結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)和脂類(lèi)分子又與寡糖鏈結(jié)合為糖蛋白和糖脂分子,糖蛋白和糖脂分子伸至細(xì)胞表面的分枝狀寡糖鏈在質(zhì)膜表面形成細(xì)胞外被(又稱(chēng)為糖萼)。許多研究結(jié)果表明:細(xì)胞間的分子識(shí)別、細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化、免疫反應(yīng)和腫瘤發(fā)生等均與細(xì)胞外被(分枝狀寡糖鏈)有關(guān)。凝集素能與細(xì)胞外被的糖分子相連接、在細(xì)胞間形成“橋”,從而達(dá)到細(xì)胞凝集的效果。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1、觀察血細(xì)胞的凝集現(xiàn)象;
2、掌握凝集素促使細(xì)胞凝集的原理。
實(shí)驗(yàn)原理
凝集素(1ectin)是一類(lèi)含糖的(少數(shù)凝集素例外)并能與糖進(jìn)行專(zhuān)一性結(jié)合的蛋白質(zhì),它具有凝集細(xì)胞和刺激細(xì)胞分裂的作用。凝集素促使細(xì)胞凝集主要是由于它能與細(xì)胞外被的糖分子相連接、在細(xì)胞間形成“橋”的結(jié)果,且加入與凝集素互補(bǔ)的糖分子可以抑制細(xì)胞間的凝集反應(yīng)。
實(shí)驗(yàn)用品
一、器材
顯微鏡、托盤(pán)天平、載玻片若干、滴管2支、離心管2支。
二、試劑
pbs緩沖液:稱(chēng)取NaCl 7.2g、NazHP04 1.48g、KH2P04 0.43g、加蒸餾水,定容至l000 mL,調(diào)pH值到7.2。
三、實(shí)驗(yàn)材料
1.土豆塊莖。
2.2%的紅細(xì)胞
以無(wú)菌方法抽取兔子靜脈血液(加抗凝劑),用生理鹽水洗5次,每次2000 r/min,離心5 min,zui后按沉淀壓積的紅細(xì)胞體積用生理鹽水配成2%紅細(xì)胞懸液
實(shí)驗(yàn)方法
稱(chēng)取土豆去皮塊莖2g
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加10 mL PBS緩沖液,浸泡2h(浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素)
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載玻片上滴一滴土豆凝集素
↓
再滴一滴2%紅細(xì)胞液
↓充分混勻
靜置20 min
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低倍顯微鏡下觀察血球凝集現(xiàn)象
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以PBS液加2%血細(xì)胞懸液作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)