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技術文章

牛血清白蛋白殘留量測定法

點擊次數(shù):1862 發(fā)布時間:2013-8-20

本法系用酶聯(lián)免疫法測定供試品中牛血清白蛋白(BSA)含量量,以判斷供試品中BSA殘殘留量是否符合規(guī)定的檢測方法。以牛血清白蛋白標準品為標準,采用直線回歸方法計算供試品中牛血清白蛋白含量。
    供試品溶液的制備 供試品如為凍干劑型,檢測前應按標示量復溶后震蕩混勻,室溫靜置30分鐘,檢測前應再次震蕩混勻。供試品如為液體劑型可直接用于檢測。采用試劑盒提供的供試品稀釋液稀釋供試品,供試品應至少進行兩個稀釋度測定,每個稀釋度做雙孔平行測定。測定BSA含量的容器具應,防止實驗室中BSA污染。
    干擾試驗 制備溶液A(供試品溶液倍比稀釋)、B(供試品溶液和30ng/ml的內(nèi)控標準品等量混合)和C(30ng/ml的內(nèi)控標準品倍比稀釋)。其中,供試品溶液BSA含量高于試劑盒測定范圍中點時,兩倍稀釋后制備溶液A和B。溶液A、B可倍比稀釋測定,溶液C應多孔測定,并在試驗間均勻添加。
  測定法 按試劑盒說明書進行。試劑盒標準品的吸光度值(A值)、內(nèi)控參考品測定值、標準品線性相關系數(shù)、雙孔測定吸光度值(A值)均應在試劑盒要求范圍內(nèi),試驗有效。以試劑盒提供的標準品吸光度值(A值)和濃度制定標準曲線,根據(jù)供試品的A值計算供試品中BSA含量,按試劑盒說明書要求判定zui終結果。
供試品測定時,低稀釋度A值明顯低于高稀釋度A值時可能存在HOOK效應或操作失誤,需重試或調整稀釋倍數(shù)進行檢測。應用該試劑盒的供試品應進行干擾試驗。干擾試驗中B-A值應在C值測定的95%可信區(qū)間內(nèi)。

 

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