人抗表皮細胞基底膜抗體（EBMZ）ELISA試劑盒（Import 96T）
 中文簡稱：人抗表皮細胞基底膜抗體ELISA試劑盒  英文簡稱：（EBMZ）ELISA KIT

內容目錄導航：ELISA簡介  ELISA試劑組成  ELISA測定步驟  ELISA試劑展示

人抗表皮細胞基底膜抗體（EBMZ）ELISA試劑盒（Import 96T）敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷試劑盒。且擁有試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等特點。ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。ELISA常用方法：雙抗體夾心法測定。規(guī)格：96T/48T。試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%。保存條件及有效期：試劑盒保存：2-8℃，有效期：6個月。
ELISA試劑組成
1．抗原 在ELISA中應用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有3類，即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。
2．抗體 在ELISA中應用的抗體可分為多克隆抗體（多抗）和單克隆抗體（單抗）。多抗取白免疫動物的抗血清，制備較簡單，但抗血清成分復雜，除含針對抗原（多個表位）的抗體外，還含有多種其他抗體，親和力和特異性相對要低于單抗，且制備周期長，批間差異較大。
3．酶和底物 在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP
（1）HRP：是一種糖蛋白，含糖量約18％，分子量為44kD，在蔬菜作物辣根中含量很高。（2）ALP：是一種磷酸酯的水解酶，用做示蹤酶的ALP活性應在l 000U／mg以上。
4．固相載體 固相載體是ELISA中用以分離結合標記物和游離標記物的主要手段，應與各種免疫活性物質有良好的結合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。
5．包被 將免疫活性物質（抗原或抗體）結合于固相載體上的過程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等；常用的方法有吸附法、化學交聯(lián)法及親和素-*間接包被法。
ELISA測定步驟
測定時一般需經(jīng)過以下步驟：固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結果。ELISA操作較繁雜，操作不當將引起較大的誤差。在操作中應注意以下5個方面。
1．隨著病情的進展或由其他因素影響，某些抗體在機體內的含量發(fā)生大幅波動，因此有必要對標本進行預處理，例如對血清標本作適當稀釋，或離心分離血脂等。間接法測定中，標本適當稀釋還可降低非特異性反應。
2．加樣一般使用加液器，在ELISA中一般有4次加樣：加標本、加酶結合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶結合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3．在成批手工檢測中，還應注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原抗體反應和酶促反應時間不*，對競爭法及定量檢測影響很大，不注意可能會導致錯誤結果或定量不準。
4．洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟。目的是除去未結合的免疫反應物，終止抗原抗體反應，除去標本中與反應無關的成分、游離的酶標物以及反應過程中吸附于固相載體上的非特異性物質?？捎孟窗鍣C洗板或手工洗板，前者洗滌質量較好，各反應孔洗滌效果均一，批內、批間差異小，手工洗板應注意控制各孔洗滌效果，差異不宜太大。
5．準確判定結果須使用ELISA測讀儀（酶標儀），比色法判讀可選擇單波長或雙波長，根據(jù)反應液顏色的不同選用不同波長的濾光片，以空白孔校零測定反應孔的吸光度值（A值）。酶標儀具有良好的重復性。
ELISA試劑展示

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