大鼠凝聚素(CLU)ELISA試劑盒(elisa kit)
中文簡稱:大鼠凝聚素ELISA試劑盒 英文簡稱: (CLU)EELISA KIT
ELISA簡介 內(nèi)容目錄導航:ELISA簡介 ELISA試劑組成 ELISA測定步驟 ELISA試劑展示
大鼠凝聚素(CLU)ELISA試劑盒(elisa kit)敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷試劑盒。且擁有試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等特點。使用方法一:96T ELISA試劑盒(標本90個,標準曲線6個|標本94個,標準對照2個)。 使用方法二:48T ELISA試劑盒(標本42個,標準曲線6個|標本47個,標準對照1個)。ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。ELISA常用方法:雙抗體夾心法測定。規(guī)格:96T/48T。試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%。保存條件及有效期:試劑盒保存:2-8℃,有效期:6個月。
ELISA實驗中zui可能出現(xiàn)問題
一、 所有孔未顯色 1、分析原因: 1) 微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。 2) 用錯試劑。 3) 在操作中忘記加酶或抗體。 2、解決辦法: 1) 檢查洗板器械,比如洗板機管道是否堵塞、洗液是否用完。 2) 在加樣前,要看清瓶簽。 3) 嚴格按說明書操作步驟進行實驗,確保每步都到位。 二、 所有孔顯色偏低 1、分析原因: 1) 微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。 2) 洗板不干凈。 3) 抗體污染了酶結合物等其它試劑。 4) 溫度沒達到要求。 5) 每孔加入的試劑量低于說明書要求量。 2、解決辦法: 1) 手工加蒸餾水洗板時,要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。 2) 洗板時要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。 3) 嚴格按說明書要求操作,每次取樣要更換吸頭。 4) 控制孵育溫度在25℃。 5) 加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時務必將吸頭內(nèi)液體打盡。
ELISA測定步驟
大鼠凝聚素(CLU)ELISA試劑盒(elisa kit)測定時一般需經(jīng)過以下步驟:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結果。ELISA操作較繁雜,操作不當將引起較大的誤差。在操作中應注意以下5個方面。
1.隨著病情的進展或由其他因素影響,某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動,因此有必要對標本進行預處理,例如對血清標本作適當稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標本適當稀釋還可降低非特異性反應。
2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3.在成批手工檢測中,還應注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反應和酶促反應時間不*,對競爭法及定量檢測影響很大,不注意可能會導致錯誤結果或定量不準。
4.洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟。目的是除去未結合的免疫反應物,終止抗原抗體反應,除去標本中與反應無關的成分、游離的酶標物以及反應過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)??捎孟窗鍣C洗板或手工洗板,前者洗滌質(zhì)量較好,各反應孔洗滌效果均一,批內(nèi)、批間差異小,手工洗板應注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。
5.準確判定結果須使用ELISA測讀儀(酶標儀),比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據(jù)反應液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反應孔的吸光度值(A值)。酶標儀具有良好的重復性。
ELISA試劑展示
大鼠凝聚素(CLU)ELISA試劑盒(elisa kit)
3T3 swiss swiss鼠胚胎成纖維細胞 3T3L1 小鼠胚胎成纖維細胞(前脂肪) 3T6swiss 小鼠胚胎成纖維細胞 BA/F3 小鼠原B細胞 BHK-21 金黃地鼠腎 BS-C-1 非注洲綠猴腎 C2C12 小鼠成肌細胞 C3H 10T1/2 2A6 小鼠成纖維細胞 CHOdhfr 二氫*缺陷型中國倉鼠卵巢細胞 CHO-K1 中國倉鼠卵巢細胞 COS-1 非洲綠腎 COS-7 非洲綠猴腎細胞 CV-1 猴腎細胞 IAR20 小鼠肝細胞 IEC-6 大鼠小腸隱窩上皮細胞 LL-PK1, 豬腎細胞 MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨細胞 MDCK 狗腎細胞 MEF 小鼠胚胎成纖維細胞 NIH3T3 小鼠胚胎成纖維細胞
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