大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒(elisa kit)
中文簡稱:大鼠D-乳酸脫氫酶ELISA試劑盒 英文簡稱: (D-LDH)EELISA KIT
ELISA簡介 內容目錄導航:ELISA簡介 ELISA試劑組成 ELISA測定步驟 ELISA試劑展示
大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒(elisa kit)敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷試劑盒。且擁有試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等特點。使用方法一:96T ELISA試劑盒(標本90個,標準曲線6個|標本94個,標準對照2個)。 使用方法二:48T ELISA試劑盒(標本42個,標準曲線6個|標本47個,標準對照1個)。ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。ELISA常用方法:雙抗體夾心法測定。規(guī)格:96T/48T。試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%。保存條件及有效期:試劑盒保存:2-8℃,有效期:6個月。
ELISA實驗中zui可能出現(xiàn)問題
一、 所有孔未顯色 1、分析原因: 1) 微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。 2) 用錯試劑。 3) 在操作中忘記加酶或抗體。 2、解決辦法: 1) 檢查洗板器械,比如洗板機管道是否堵塞、洗液是否用完。 2) 在加樣前,要看清瓶簽。 3) 嚴格按說明書操作步驟進行實驗,確保每步都到位。 二、 所有孔顯色偏低 1、分析原因: 1) 微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。 2) 洗板不干凈。 3) 抗體污染了酶結合物等其它試劑。 4) 溫度沒達到要求。 5) 每孔加入的試劑量低于說明書要求量。 2、解決辦法: 1) 手工加蒸餾水洗板時,要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。 2) 洗板時要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。 3) 嚴格按說明書要求操作,每次取樣要更換吸頭。 4) 控制孵育溫度在25℃。 5) 加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時務必將吸頭內液體打盡。
ELISA測定步驟
大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒(elisa kit)測定時一般需經過以下步驟:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結果。ELISA操作較繁雜,操作不當將引起較大的誤差。在操作中應注意以下5個方面。
1.隨著病情的進展或由其他因素影響,某些抗體在機體內的含量發(fā)生大幅波動,因此有必要對標本進行預處理,例如對血清標本作適當稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標本適當稀釋還可降低非特異性反應。
2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3.在成批手工檢測中,還應注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反應和酶促反應時間不*,對競爭法及定量檢測影響很大,不注意可能會導致錯誤結果或定量不準。
4.洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟。目的是除去未結合的免疫反應物,終止抗原抗體反應,除去標本中與反應無關的成分、游離的酶標物以及反應過程中吸附于固相載體上的非特異性物質。可用洗板機洗板或手工洗板,前者洗滌質量較好,各反應孔洗滌效果均一,批內、批間差異小,手工洗板應注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。
5.準確判定結果須使用ELISA測讀儀(酶標儀),比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據(jù)反應液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反應孔的吸光度值(A值)。酶標儀具有良好的重復性。
ELISA試劑展示
大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒(elisa kit)
150532 泌乳素 標準品 免疫測定用 150533 促卵泡生成激素 標準品 免疫測定用 150534 生長激素 標準品 免疫測定用 150535 *β亞單位 標準品 免疫測定用 150536 人胎盤泌乳素 標準品 免疫測定用 150540 鐵蛋白 標準品 免疫測定用 150541 癌胚抗原 標準品 免疫測定用 150542 甲胎蛋白 工作標準品 免疫測定用 150543 前列腺特異抗原 標準品 免疫測定用 150544 游離前列腺特異抗原 標準品 免疫測定用 150550 三碘甲腺原氨酸 標準品 免疫測定用 150551 甲狀腺素 標準品 免疫測定用 150552 反三碘甲腺原氨酸 標準品 免疫測定用 150553 人胰島素C-肽 標準品 免疫測定用 150554 胰高血糖素 標準品 免疫測定用 150555 *(曾用名:*) 標準品 免疫測定用 150600 細菌內毒素 標準品 細菌內毒素檢查 150601 細菌內毒素 工作標準品 細菌內毒素檢查
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