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綿羊白介素2受體(IL-2R)elisa試劑盒操作步驟

時間:2021/8/10閱讀:460
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綿羊白介素2受體(IL-2R)elisa試劑盒操作步驟:


. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔0孔,在di一、第二孔中分別加標準品00μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取00μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘.

0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘。

過氧化物酶(GPX)微量法0.2g或者0.2mL

硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)微量法0.2g或者0.2mL

S-轉(zhuǎn)移酶(GST)微量法0.2g或者0.2mL

還原酶(GR)微量法0.2g或者0.2mL

硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)微量法0.2g或者0.2mL

γ-谷氨酰半連接酶(GCL)微量法0.2g或者0.2mL

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性測定微量法0.2g或者0.2mL

抗壞血酸(AsA)含量微量法0.2g或者0.2mL

脫氫抗壞血酸(DHA)含量微量法0.2g或者0.2mL

L-半乳糖苷-,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)微量法0.2g或者0.2mL

抗壞血酸氧化酶(AAO)活性測定微量法0.2g或者0.2mL

抗壞血酸過氧化物酶(APX)測定微量法0.2g或者0.2mL

單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)微量法0.2g或者0.2mL

脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性測定微量法0.2g或者0.2mL

二胺氧化酶(DAO)測試盒微量法0.2g或者0.2mL

銅藍蛋白(Cp)含量測試盒微量法0.2g或者0.2mL

植物總酚(Tp)測試盒微量法0.5g或者0.2mL

植物原花青素(OPC)測試盒微量法0.5g或者0.2mL

尿酸(UA)含量測試盒微量法0.2g或者0.2mL

 

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