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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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熒光素標(biāo)記胰島素受體-α蛋白抗體IgG

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更新時(shí)間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):741次

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熒光素標(biāo)記胰島素受體-α蛋白抗體IgG抗體保存指南
抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。本公司抗體保存,同樣也可以應(yīng)用到其他絕大部分公司的抗體產(chǎn)品!
請(qǐng)謹(jǐn)記!無(wú)論何時(shí)請(qǐng)按照說明書的保存條件正確保存抗體!
o . 收到抗體后請(qǐng)務(wù)必在2000rpm 離心20-30s 后再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存!
質(zhì)優(yōu)的抗體使用非常特殊的儲(chǔ)存管,只有在2000rpm 離心20-30s 才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來(lái)。即使是在0000rpm 離心也會(huì)導(dǎo)致離心不*,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象!
熒光素標(biāo)記胰島素受體-α蛋白抗體IgG對(duì)于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20 度 or -80 度對(duì)
絕大多數(shù)抗體來(lái)說,保存在-20 度是*足夠了。沒有任何證據(jù)顯示保存在-80
度 會(huì)有更多的好處!
o .分裝可以zui大程度的降低反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害,同時(shí)也降低了由于多次
從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
o .分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好,zui少不能少于0ul 每份。因?yàn)榉盅b體積越小,
抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響
o 復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4 度,避免再凍起來(lái)!
o 抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,在4 度 盡量不要超過 天。
o 避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是
門上
o . 大部分抗體收到后4 度短暫保存-2 周對(duì)抗體活性是沒有影響的。
如果抗體很快(-2 周)會(huì)使用,在4 度保存,這是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害。
如果要保存則是在-20 度 or -80 度。zui關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據(jù)說明書的方式來(lái)正確的保存抗體!
但是,腹水形式的產(chǎn)品請(qǐng)?jiān)谑盏胶罅⒓磧銎饋?lái)!因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶,在4 度保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解!
o .大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過程需要-2 周的時(shí)間,所以是在4 度的條件下來(lái)完成的。 4 度運(yùn)輸zui主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來(lái)的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運(yùn)輸過程中避免干冰運(yùn)輸!
上海谷研生物科技有限公司特殊抗體的保存條件:
. 酶聯(lián)抗體:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來(lái)。否則會(huì)導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失
2. 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對(duì)
光極為敏感,因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的!
3. IgG3 的同型對(duì)照:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來(lái)。因?yàn)槿绻霈F(xiàn)凍融過程,該抗體非常
容易形成多聚體無(wú)論是保存還是運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融!
反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力!
關(guān)于加入甘油保存:有些人會(huì)加50%的甘油到抗體中來(lái)避免反復(fù)凍融,甘油在-20 度 會(huì)降低冰點(diǎn)。這對(duì)很多抗體可能是可行的。但是abcam 僅對(duì)非常小的一部分抗體檢測(cè)過其在這種條件下的穩(wěn)定性;而abcam 只對(duì)按照條件保存的抗體提供質(zhì)量保證!加入甘油的溶液不建議在-80 度保存,因?yàn)檫@已經(jīng)超過了甘油的冰點(diǎn)。如果您要加入甘油來(lái)保存抗體的話,請(qǐng)謹(jǐn)慎注意無(wú)菌操作,避免污染!
關(guān)于蛋白保護(hù)劑:
蛋白在高濃度時(shí)更不容易降解( mg/ml 或者更高),這就是為什么在抗體中加入BSA 之類作為穩(wěn)定劑的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來(lái)標(biāo)記的話,則不能加入蛋白穩(wěn)定劑,因?yàn)檫@些穩(wěn)定劑會(huì)和抗體一起競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合標(biāo)記物。
關(guān)于*(sodium azide)的使用:
為了防止微生物污染,*經(jīng)常被加入到抗體中(終濃度0.02% (w/v))。Abcam 的很多抗體已經(jīng)含有了0.02%-0.05%的*,在說明書的“Storage buffer”中有標(biāo)明的。
在下述情況中不能使用*:
• 如果抗體用于染色或處理活細(xì)胞,用于體內(nèi)研究:
*在抵抗微生物的同時(shí),對(duì)其它大部分有機(jī)物也是有毒的,因?yàn)樗钄嗔司€粒體的
cytochrome electron transport system.
• 要偶聯(lián)帶有氨基基團(tuán)的抗體:
*會(huì)干擾任何含有氨基基團(tuán)的偶聯(lián),因此在進(jìn)行偶聯(lián)之前,應(yīng)將*去除。偶聯(lián)后的抗體可以加入*保存,但是濃度只能是0.0%。對(duì)于需要偶聯(lián)的抗體,thimerosal
(merthiolate)可以替代*作為保護(hù)劑!
注:*的去除方式:
可以通過凝膠電泳或過濾的方式去除!IgG 的分子量是50kDa (IgM 是~ 600kDa); *的分子量只有65Da。使用cut off 4kDa 的濾膜即可將*從抗體中去除
抗體說明書樣本
上海谷研生物科技有限公司放價(jià)產(chǎn)品信息:
OVCAR-3 卵巢癌細(xì)胞
SGC790 胃低分代腺癌細(xì)胞
SK-OV-3 卵巢癌細(xì)胞
HuTu-80 十二指腸腺癌細(xì)胞
SKOV-3/DDP 卵巢癌耐藥株
Caco-2 結(jié)腸癌細(xì)胞
HeLa 宮頸癌細(xì)胞
CoLo205 結(jié)腸癌細(xì)胞
HelaS3 宮頸癌細(xì)胞
CoLo 320DM 結(jié)腸癌細(xì)胞
HEC-B 子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞
HCT-8 回盲腸腺癌細(xì)胞
JEG-3 絨癌細(xì)胞
HCT-6 低分化結(jié)腸腺癌細(xì)胞
DU-45 前列腺癌細(xì)胞
HT-29 結(jié)腸腺癌細(xì)胞
LNCa 前列腺癌細(xì)胞
Lovo 結(jié)腸癌細(xì)胞
LNCaP clone FGC 前列腺癌細(xì)胞
SW480 結(jié)腸癌細(xì)胞

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