堿性磷酸酶（ALP）-PAS 聯(lián)合染色試劑盒說明書
產(chǎn)品簡介：
堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，簡稱ALP 或AKP）為一類磷酸酯酶，廣泛分布于
哺乳動(dòng)物組織內(nèi)，其活性所需zui適pH 9.2～9.8。此酶主要存在于物質(zhì)交換活躍之處（細(xì)胞
膜），如腸上皮和腎近曲小管的刷狀緣、附睪上皮之靜纖毛、肝的毛細(xì)膽管膜以及微動(dòng)脈和
毛細(xì)血管動(dòng)脈部之內(nèi)皮。此酶還見于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、吞飲小泡、腸上皮之溶酶體、
中性粒細(xì)胞之中性顆粒以及平滑肌之細(xì)胞膜及吞飲小泡。
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一，McManus 在1946 年zui先使用高碘酸-雪
夫技術(shù)顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖。過碘酸（高碘酸）是一種強(qiáng)氧化劑，
它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1，2-乙二醇基，使之變?yōu)槎┡cSchiff 試劑能結(jié)合成一
種品紅化合物，產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)，使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高
碘酸濃度和氧化時(shí)間，使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基，又不至于過氧化，這是很
關(guān)鍵的步驟。
ALP-PAS 聯(lián)合染色試劑盒不僅能夠顯示堿性磷酸酶活性位點(diǎn)和糖原等物質(zhì)，
亦能區(qū)分二者。冰凍切片及石蠟切片均可。
產(chǎn)品組成：

操作步驟：
1、石蠟切片脫蠟至雙蒸水。
2、冰凍切片在丙酮-氯仿等量混合液內(nèi)固定（4℃） 2～5min。
3、切片入試劑（A），37℃，冰凍切片5～15min，石蠟切片2～12h。
編號(hào)
名稱 （6×50ml） （6×50ml） （6×50ml）
Storage
試劑（A）: ALP 孵育液 50ml 100ml 500ml 4℃
試劑（B）: 硝酸鈷溶液 50ml 100ml 500ml RT
試劑（C）: 硫化胺溶液 50ml 100ml 500ml RT
試劑（D）: 高碘酸水溶液 50ml 100ml 500ml 4℃
試劑（E）: Schiff 液 50ml 100ml 500ml 4℃
試劑（F）: 亞硫酸水溶液 50ml 100ml 500ml RT
試劑（G）: 陰性對(duì)照 10ml 20ml 50ml 4℃
使用說明書 1 份
南京森貝伽生物科技有限公司

4、流水洗2min 后入雙蒸水。
5、入試劑（B），37℃，5min。
6、流水洗5min 后入雙蒸水。
7、入試劑（C）2min。
8、流水洗10min 后入雙蒸水。
9、試劑（D），室溫2～5min。
10、雙蒸水換洗3 次。
11、入試劑（E），37℃，10～30min。
12、試劑（F）水洗3 次，每次2min，入雙蒸水。
13、冰凍切片用明膠封片；石蠟切片脫水。
14、透明。
15、中性樹膠封片。
染色結(jié)果：堿性磷酸酶活性部位呈黑色，PAS 陽性物質(zhì)呈紫紅色。
陰性對(duì)照：
1、切片經(jīng)過陰性對(duì)照染色，結(jié)果陰性。
2、切片進(jìn)入孵育液前，可先經(jīng)碘、5%*溶液各3min，充分水洗后再進(jìn)行孵育等
步驟。因碘有抑制酶反應(yīng)作用，故可用此法作對(duì)照。
注意事項(xiàng)：
1、適用于冰凍切片、石蠟切片。
2、染色過程中注意控制過碘酸處理的時(shí)間，否則容易褪色。
3、堿性磷酸酶顯色后，經(jīng)高碘酸應(yīng)特別小心，嚴(yán)格控制時(shí)間，否則褪色。
4、冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。
5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
6、使用場所應(yīng)通風(fēng)，并遠(yuǎn)離火源。
儲(chǔ)存條件：試劑（A）、試劑（D） 、試劑（E） 、試劑（G）應(yīng)置于4℃, 避光保存；其余應(yīng)置于室溫；
6 個(gè)月有效。