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大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒操作說明
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- 【資料簡介】
大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒操作說明
雪還在下著,不一會兒就變成了鵝毛大雪,隨風(fēng)飄舞,天地間變成了白茫茫的一片,這些可愛的雪 精靈還在半空中跳著舞呢。這個雪和南北極的雪不同的,那里的雪下起來,像利劍一樣,鋪天蓋地的, 四周變得昏暗,不明亮,不見一絲光。而這里的雪呢?輕飄飄的,就如從天空中撒下千萬顆珍珠。接下來介紹 大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒操作說明。
以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
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