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小鼠雜交瘤細(xì)胞,7F2細(xì)胞
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細(xì)胞融合的具體步驟包括:小鼠雜交瘤細(xì)胞,7F2細(xì)胞
(1)細(xì)胞準(zhǔn)備,分貼壁和懸浮細(xì)胞兩種。前者可直接將兩親本細(xì)胞混合培養(yǎng),后者需制成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。
(2)細(xì)胞融合,加促融因子于將行融合的細(xì)胞之中,誘導(dǎo)融合。
(3)雜種細(xì)胞選擇。利用選擇性培養(yǎng)基等,使親本細(xì)胞死亡,而讓雜種細(xì)胞存活。
(4)雜種細(xì)胞克隆。對選出的雜種細(xì)胞進(jìn)行克。ㄟx擇與純化),經(jīng)過培養(yǎng),就能獲得所需要的無
小鼠雜交瘤細(xì)胞,7F2細(xì)胞動物細(xì)胞融合圖
小鼠雜交瘤細(xì)胞,7F2細(xì)胞
植物細(xì)胞融合較動物細(xì)胞難些。首先,植物細(xì)胞外面有細(xì)胞壁,因此需要先用纖維素酶去壁,形成原生質(zhì)體后,才能進(jìn)行細(xì)胞融合。其次,植物細(xì)胞融合后形成的雜種細(xì)胞,經(jīng)過培養(yǎng)有可能分化發(fā)育成植株,而動物細(xì)胞的雜種細(xì)胞則缺乏此種能力。植物體細(xì)胞融合的過程大致包括:細(xì)胞分離,原生質(zhì)體制備,原生質(zhì)體融合,雜種細(xì)胞篩選及其培養(yǎng),然后再通過愈傷組織誘導(dǎo)分化出根、莖、葉,zui后長成完整的體細(xì)胞雜種植株。植物細(xì)胞融合技術(shù)不僅打破了常規(guī)有性雜交育種的親和性障礙,而且為實現(xiàn)“超遠(yuǎn)緣雜交”提供了可能,有重大的應(yīng)用價值。
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