MDCK細(xì)胞培養(yǎng)

【資料簡介】

一、目的

MDCK細(xì)胞培養(yǎng)是分離流感病毒及相關(guān)研究實(shí)驗(yàn)的基本技術(shù)。疾控中心的所有技術(shù)人員，必須按照本文件相關(guān)的操作規(guī)程進(jìn)行操作。

二、適用范圍

適用于疾控中心所有技術(shù)人員 。

三、程序

（一）生物安全要求

實(shí)驗(yàn)室生物安全級(jí)別：BSL-1

所有操作必須在BSL-1實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜里進(jìn)行。

（二）材料

1. 生長成片的MDCK細(xì)胞

2. 無菌的T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

3. D-MEM培養(yǎng)液（含有L-）

4. 青、母液（10000 U/mLG；10000µg/mL硫酸），分裝后保存于-20℃

5. HEPES緩沖液，1M母液

6. 胎牛血清

7. EDTA-（0.05%，0.53mM EDTA-4Na），分裝后保存于-20℃

8. 7.5%牛血清白蛋白組分V

9. 1mL、10mL無菌移液管

10. 70％～75％的酒精

注意事項(xiàng)：經(jīng)常檢查試劑使用的有效期。