細(xì)胞骨架綠色熒光染色試劑盒 產(chǎn)品說明書（中文版）

【資料簡介】

主要用途

細(xì)胞骨架（肌動蛋白微絲；F-ACTIN）綠色熒光染色試劑是一種旨在使用異硫氰酸熒光素標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽（phalloidin），探尋細(xì)胞骨架的絲狀肌動蛋白的分布和局部定向變化狀況的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。主要適用于各種活體細(xì)胞（動物、人體、植物等）的細(xì)胞骨架裝配的檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，反應(yīng)敏感，操作簡捷，性能穩(wěn)定。

技術(shù)背景

肌動蛋白（actin）是42KD的球蛋白，構(gòu)成細(xì)胞骨架的微絲（microfilament）和肌肉收縮裝置的細(xì)肌絲（thin filament），以及細(xì)胞膜表面?zhèn)巫悖?/span>pseudopodia）和微絨毛（microvilli）。肌動蛋白存在于所有真核生物細(xì)胞中，且高度進(jìn)化保留，參與各種重要細(xì)胞功能，包括細(xì)胞遷移、細(xì)胞分裂、肌肉收縮、細(xì)胞形態(tài)維護(hù)、膜轉(zhuǎn)運(yùn)（membrane trafficking） 等。哺乳動物具有六種異構(gòu)體，分成α、β、γ三類。球狀肌動蛋白（G-actin）在生理?xiàng)l件下，組合成長絲聚合體，轉(zhuǎn)化為絲狀肌動蛋白（F-actin），形成細(xì)胞骨架的微絲。肌動蛋白的聚合與解聚的動態(tài)學(xué)變化是細(xì)胞骨架裝配（cytoskeleton assembly）的主要參數(shù)之一。鬼筆環(huán)肽（phalloidin）是一種由毒性菇類中分離的二環(huán)七肽（bicyclic heptapeptide）生物堿，與聚合的微絲（F-肌動蛋白）結(jié)合，因此通過異硫氰酸熒光素（FITC）標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽可以體外探測細(xì)胞F-肌動蛋白的分布和含量，據(jù)此分析細(xì)胞骨架裝配的調(diào)控機(jī)制。 

產(chǎn)品內(nèi)容

清理液（Reagent A）        毫升

固著液（Reagent B）        毫升

通透液（Reagent C）        毫升

封阻液（Reagent D）        毫升

染色液（Reagent E）      微升

復(fù)染液（Reagent F）       微升

產(chǎn)品說明書   1份

保存方式

保存染色液（Reagent E）和復(fù)染液（Reagent F）在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；其余的保存在4℃冰箱里，避免光照；有效保證6月

用戶自備

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液：用于細(xì)胞脫離

*細(xì)胞培養(yǎng)液：用于中和胰蛋白酶的處理

15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器

1.5毫升離心管：用于細(xì)胞染色的容器

（微型）臺式離心機(jī)：用于樣品操作

熒光（共聚焦）顯微鏡：用于細(xì)胞熒光觀察