人透明質(zhì)酸（HA）ELISA試劑盒

【資料簡(jiǎn)介】

人透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 人透明質(zhì)酸（HA）ELISA試劑盒包被等于抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。當(dāng)抗原決定簇存在于或臨近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，直接包被效果不佳，可以采用間接的捕捉包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、魚精蛋白等作預(yù)包被，也可進(jìn)步核酸的結(jié)協(xié)力。人透明質(zhì)酸（HA）ELISA試劑盒，可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12h），以增加其吸附機(jī)能。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。此間接結(jié)合在固相上的抗原闊別載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大進(jìn)步，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕捉包被法,試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。也可用親和素生物素系統(tǒng)作間接包被，即用親和素先包被載體，然后加入生物素化的DNA，這種包被方法平均、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。這種物理吸附長(zhǎng)短特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。間接包被的另一長(zhǎng)處是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。