500 毫摩爾超氧陰離子清除劑TEMPOL 溶液產(chǎn)品說明書

【資料簡介】

500 毫摩爾超氧陰離子清除劑TEMPOL 溶液產(chǎn)品說明書（中文版）
主要用途
500 毫摩爾超氧陰離子清除劑TEMPOL 溶液是一種旨在模擬超氧化物歧化酶的功能，清除超氧自由基陰離
子的輔助試劑。其適用于氧化應(yīng)急活性氧等研究。其適用于各種細(xì)胞培養(yǎng)、動物實驗中超氧自由基陰離子
的清除。產(chǎn)品即到即用，嚴(yán)格無菌，性能穩(wěn)定，高純活性。
技術(shù)背景
4-羥基-2,2,6,6,-四甲基哌啶氧（4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidinyloxy；TEMPO）是一種自旋標(biāo)記（spin
label）的水溶性穩(wěn)定哌啶氮氧化合物（piperidine nitroxide），分子式是C9H18NO2，分子量為172.24。其主
要作用在于自由通過質(zhì)膜，具有超氧化物歧化酶的功能，清除超氧自由基陰離子，起到活性氧的解毒作用，
同時具有神經(jīng)保護、抗炎和鎮(zhèn)痛作用。
產(chǎn)品內(nèi)容
清除劑（Reagent A） 毫升
產(chǎn)品說明書1 份
保存方式
保存在－20℃冰箱里，避免光照；有效保證6 月
用戶自備
*細(xì)胞培養(yǎng)液：用于支持細(xì)胞生長的營養(yǎng)液
細(xì)胞培養(yǎng)板（瓶）：用于細(xì)胞培養(yǎng)的容器
蓋玻片：用于細(xì)胞生長的載體
臺式離心機：用于懸浮細(xì)胞的收集
細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于細(xì)胞孵育
15 毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器
實驗提示
實驗開始前，將－20℃冰箱里的清除劑（Reagent A）置于冰槽里融化。然后進行下列操作：
方法一：貼壁細(xì)胞處理
1． 在6 孔細(xì)胞培養(yǎng)板里的1 孔放置蓋玻片
2． 加入2 毫升用戶自備的*細(xì)胞培養(yǎng)液
3． 加入1 毫升待測細(xì)胞（1 至5 X 105 細(xì)胞）
4． 輕輕搖動，使細(xì)胞均勻分布
5． 放進37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育，直至細(xì)胞生長到50％鋪滿率
6． 小心抽掉細(xì)胞培養(yǎng)液
7． 加入3 毫升新鮮的用戶自備的*細(xì)胞培養(yǎng)液
8． 加入xx 微升清除劑（Reagent A）
9． 輕輕搖動培養(yǎng)板，混勻
10．放進37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24 小時
11．小心抽掉含有清除劑（Reagent A）的細(xì)胞培養(yǎng)液
12．繼續(xù)后續(xù)操作
方法二：懸浮細(xì)胞處理
1． 準(zhǔn)備1 個25cm2 細(xì)胞培養(yǎng)瓶
2． 加入2 毫升用戶自備的*細(xì)胞培養(yǎng)液
3． 加入1 毫升待測細(xì)胞（5 X 105 細(xì)胞）
4． 輕輕搖動，使細(xì)胞均勻分布
5． 放進37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24 小時
6． 小心移出細(xì)胞培養(yǎng)液到15 毫升錐形離心管
7． 放進臺式離心機離心10 分鐘，速度為300g
8． 小心抽掉上清液
9． 加入3 毫升新鮮的*細(xì)胞培養(yǎng)液，混勻細(xì)胞顆粒群
10．加入xx 微升清除劑（Reagent A）
11．輕輕搖動離心管，混勻
12．放進37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24 小時
13．放進臺式離心機離心10 分鐘，速度為300g
14．小心抽掉含有清除劑（Reagent A）的細(xì)胞培養(yǎng)液
15．繼續(xù)后續(xù)操作
方法三：動物實驗
1． 準(zhǔn)備1 個待測的實驗動物
2． 靜脈注射xx 微升清除劑（Reagent A）/100 克動物體重
3． 或腹腔注射xx 微升清除劑（Reagent A）/100 克動物體重
4． 或輸液/灌注xx 至xx 微升清除劑（Reagent A）/100 克動物體重
5． 注射后30 分鐘至4 小時繼續(xù)后續(xù)麻醉、斷頸椎、解剖、組織制片等操作
注意事項
1． 本產(chǎn)品為1 毫升規(guī)格（100 倍濃度）
2． 本產(chǎn)品即到即用，無需進行任何處理
3． 使用時，戴好手套
4． 避免反復(fù)凍融
5． 使用時，避免污染母液
6． 細(xì)胞孵育時間可以根據(jù)用戶的具體情況調(diào)整，通常為6 小時至24 小時
7． 動物實驗可以每天注射，持續(xù)1 周，然后觀察分析
8． 本公司提供系列活性氧清除試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定嚴(yán)格無菌