中文名稱:第一條鏈 cDNA合成試劑盒
英文名稱:First Strand cDNA Synthesis Kit
產(chǎn)品規(guī)格:50T
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0164098
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹:
本試劑盒是基于Reverse Transcriptase,該酶熱穩(wěn)定性提高,在50℃的半衰期過240min,且可長時(shí)間耐受高達(dá)55℃的反應(yīng)溫度,適合具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄,能穩(wěn)定可靠地合成cDNA。且Reverse Transcriptase的*設(shè)計(jì),進(jìn)一步增了模板親和力和行進(jìn)性,使得全長cDNA的合成能力有了大幅度提升,可獲得長達(dá)20 kb的cDNA,并且對于常見的逆轉(zhuǎn)錄抑制物具有更高的耐受度,非常適合于植物組織RNA的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。 本試劑盒包含由總RNA或mRNA合成高質(zhì)量條鏈cDNA所需的所有成分,并提供兩種cDNA合成引物:Random hexamers和oligo(dT)18。合成的單鏈cDNA產(chǎn)物可直接用來進(jìn)行后續(xù)PCR、qPCR以及PCR克隆。其中,5×RT Mix包含優(yōu)化的緩沖體系和dNTP; Enzyme Mix包含Reverse Transcriptase和RNase inhibitor??筛鶕?jù)需要,選擇Oligo (dT)18、Random hexamers或基因特異引物作為逆轉(zhuǎn)錄引物。 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
肝脂酶活性比色法定量檢測試劑盒
脂蛋白脂酶活性比色法定量檢測試劑盒
溶酶體脂酶(酸性脂酶)活性比色法定量檢測試劑盒
胰腺脂酶活性比色法定量檢測試劑盒
γ谷氨?;D(zhuǎn)移酶(GGT)定量檢測試劑盒
線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次 2-[(6-Chloro-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl)methyl]benzonitrile 865758-96-9 中文名: 分子式:C13H10ClN3O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
線粒體復(fù)合物I蛋白共沉淀分析試劑盒5次 2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid 中文名: 分子式:C12H14O3S 度:98.0%
線粒體復(fù)合物I蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次 22-Dehydroclerosteryl acetate 中文名: 分子式:C31H48O2 度:93.0%
線粒體復(fù)合物IV蛋白共沉淀分析試劑盒5次 2-Acetonaphthone 中文名:2'-萘乙酮 分子式:C12H10O 度:98.0%
線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次 2-Allylphenol 中文名:2-烯丙基酚 分子式:C9H10O 度:98.0%
第一條鏈 cDNA合成試劑盒瓊脂糖(Biowest,電泳級);西班牙瓊脂糖 Agarose 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)口原裝Biowest 111860;電泳級 Rat somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)elisa
聚乙二醇400 PEG 400 質(zhì)量規(guī)格:BR Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCPELISAKit 人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)elisa 96T/48T 進(jìn)口分裝
消胺樹脂 Cholestyramine resin 質(zhì)量規(guī)格:Each g exchanges 1.8 g- 2.2 g of glycocholate HeneggImmunoglobulinofYolk,IgYelisa雞卵黃球蛋白(IgY)elisa規(guī)格:96T/48T
蔗糖 Sucrose 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級 真菌/酵母細(xì)胞細(xì)胞壁分離試劑盒20
D-海藻糖二水 D-(+)-Trehalose, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR mouseBeta-Endorphin,β-EPELISAKit小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)elisa規(guī)格:96T/48T
氯化鈉 chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)elisa ,英文名: GRP78 ELISA Kit
鹽酸胍 Guanidine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級 小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒MouseEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 96T/48T
側(cè)金盞花醇,阿東糖醇,核糖醇 Adonitol 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) ,進(jìn)口 人分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)試劑盒 Human SFRP5 ELISA Kit
酵母浸粉;酵母粉 Yeast extract 質(zhì)量規(guī)格:FMB Grade Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa規(guī)格:96T/48T
核糖核酸酶 A 溶液 RNase A Solution 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級,>60 U/mg,10 mg/ml CDK6蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25