有絲分裂是細胞生長的決定性階段。 Cell Navigator CDy6有絲分裂成像試劑盒有絲分裂成像試劑盒是通過觀察溶酶體動力學(xué)來檢測有絲分裂的使用工具。CDy6有絲分裂成像試劑盒使用可滲透細胞的溶酶體染料CDy6，該染料在酸性環(huán)境中表現(xiàn)出高靈敏度，并在溶酶體中表現(xiàn)出明亮的信號。在有絲分裂期間，溶酶體迅速向核堆積，信號強度的急劇增加，可以實時查看。百螢生物為您提供優(yōu)質(zhì)的Cell Navigator CDy6有絲分裂成像試劑盒。
適用儀器
| 熒光顯微鏡 | |
| Ex: | Cy3/TRITC濾波片組 |
| Em： | Cy3/TRITC 濾波片組 |
| 推薦孔板: | 黑色透明底板 |
樣品實驗方案
簡要概述
在96孔板中制備細胞（100 µL /孔）
添加10X CDy6工作溶液（10 µL /孔）
添加待測化合物
在37°C下孵育
使用Cy3 / TRITC濾波片組的熒光顯微鏡成像
溶液配制
1.儲備溶液配制
CDy6儲備溶液配制
將15 µL DMSO加入小瓶CDy6（組分A）中，制成1000X CDy6儲備液，注意避光。
諾考達唑溶液配制
將50 µL DMSO加入含諾考達唑的小瓶（組分B）中，制成1000X 諾考達唑儲備液。
2.工作溶液配制
CDy6工作溶液配制
在您選擇的100 µL培養(yǎng)基或緩沖液中加入1 µL 1000X CDy6溶液，并充分混合。
注意，100 µL的10X CDy6工作溶液足以以96孔板的形式進行10次測試。在實驗之前準(zhǔn)備足夠的10X CDy6工作溶液，并立即使用。
可選：諾考達唑工作溶液（10X）
通過將1 µL 諾考達唑與100 µL培養(yǎng)基混合，制備10X 諾考達唑工作溶液以進行陽性對照。
樣品示例及操作
1.在透明底孔板中，添加1000到40,000個細胞/孔（對于96孔板為90 µL，對于384孔板為22.5 µL）。
2.向每個孔中添加10 µL /孔（96孔板）或2.5 µL /孔（384孔板）的10X CDy6工作溶液。
3.將待測化合物添加到細胞中，并在5％CO2培養(yǎng)箱中于37°C孵育（例如24、48或96小時）。
4.（可選）對于陽性對照，向每個孔中添加11X /孔（96孔板）或3 µL /孔（384孔板）的10X 諾考達唑工作溶液，并在37°C的5％CO2培養(yǎng)箱中孵育16小時℃。治療后有絲分裂細胞群將呈現(xiàn)富集狀態(tài)。
注意，應(yīng)對每個細胞系進行單獨評估，以確定細胞密度。
5.使用Cy3 / TRITC濾光片組的熒光顯微鏡成像。
