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ATP含量試劑盒(酶法),微板法

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￥970.00

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公司名稱上海宇淳生物科技有限公司
品牌其他品牌
型號
所在地上海市
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
更新時間2024/6/20 15:05:15
訪問次數(shù)453

產(chǎn)品標(biāo)簽:

ATP含量試劑盒(酶法)微板法

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上海宇淳生物科技有限公司是一家致力于生物技術(shù)服務(wù)、實驗試劑和耗材銷售，有專業(yè)的科研實驗技術(shù)服務(wù)人員。承接免疫學(xué)、分子學(xué)、細(xì)胞學(xué)、病理學(xué)、動物造模等技術(shù)實驗，可為高校醫(yī)院及科研單位提供包括病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、動物實驗等技術(shù)服務(wù)，并建立了包含實驗設(shè)計項目實施結(jié)果整理數(shù)據(jù)分析及策略咨詢等一站式的科研服務(wù)。本公司還代理許多先進(jìn)水平的產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國，在同行獲得*好評。特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類齊全、價格實惠。主營產(chǎn)品/服務(wù):試劑盒：ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒。細(xì)胞：美國*原代細(xì)胞，細(xì)胞系，細(xì)胞株，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基，耗材：細(xì)胞培養(yǎng)耗材、普通實驗耗材。生化試劑：*生化試劑、進(jìn)口分裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑。抗體：進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等等。公司的理念是：為您提供*的產(chǎn)品及服務(wù)，產(chǎn)品價格較好的競爭力。

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sigma試劑，核酸染料試劑，熒光定量PCR試劑，活體成像試劑，熒光探針試劑，細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒，超敏ECL發(fā)光液，細(xì)胞染色試劑，吸頭

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ATP含量試劑盒(酶法),微板法
三磷酸腺苷（ATP）是生物體內(nèi)能量轉(zhuǎn)換最基本的載體,是生物體內(nèi)最直接的能量來源，測定 ATP 含量并且計算能荷，能夠反映能量代謝狀態(tài)。

ATP含量試劑盒(酶法),微板法產(chǎn)品信息

ATP含量試劑盒(酶法),微板法

本試劑盒僅供科研使用 1 ATP 含量測定試劑盒說明書（貨號：WS7580W 微板法 96 樣）一、產(chǎn)品簡介：三磷酸腺苷（ATP）是生物體內(nèi)能量轉(zhuǎn)換最基本的載體,是生物體內(nèi)最直接的能量來源，測定 ATP 含量并且計算能荷，能夠反映能量代謝狀態(tài)。三磷酸腺苷（ATP）在己糖激酶和 6-磷酸葡萄糖脫氫酶混合酶的作用下，使 ATP 水解并伴隨著 NADPH 的生成，通過檢測 340nm 下 NADPH 的增加量，進(jìn)而計算得到 ATP 的含量。二、試劑盒的組成和配制：試劑名稱規(guī)格保存要求備注提取液 100mL×1 瓶 4℃保存試劑一粉劑×1 支 4℃保存臨用前甩幾下或離心，使粉劑落入底部，再加 1.1mL 蒸餾水備用。試劑二粉劑×1 支 -20℃保存臨用前甩幾下或離心，使粉劑落入底部，再加 1.1mL 蒸餾水備用。試劑三 16mL 液體×1 瓶 4℃保存試劑四粉劑×1 支 4℃保存臨用前甩幾下或離心，使粉劑落入底部，再加 1.1mL 蒸餾水備用。三、所需的儀器和用品：酶標(biāo)儀、96 孔板、恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液槍、研缽和蒸餾水。四、ATP 含量檢測：建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備： ① 組織樣本：稱取約 0.1g 組織加入研缽中，加入 1mL 提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，12000rpm，4℃離心 10min，取上清液，置冰上待測。【注】：也可以按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例提取。 ② 細(xì)菌/真菌樣本：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心棄上清；取 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液；冰浴超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3S，間隔 10S，重復(fù) 30 次）；12000rpm，4℃離心 10min，取上清液，置冰上待測。【注】：也可按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：澄清的液體直接檢測；若渾濁則離心后取上清檢測。 ④ 高蛋白含量樣本： ④-1：稱取約 0.1g 組織加入研缽中，加入 1mL 蒸餾水，進(jìn)行勻漿，轉(zhuǎn)至 EP 管中，于 95℃水浴中煮 5min，取出冷卻至室溫后于 12000rpm，室溫離心 10min，上清液待測。 ④-2：或稱取約 0.1g 組織加入研缽中，加入 0.5mL 高氯酸（0.5M），進(jìn)行冰浴勻漿， 8000rpm，4℃離心 10min，取全部上清至另一 EP 管中，再加入與上步所取上清液等體積的 KOH 或 NaOH（0.5M）混勻，使整個液體 PH 近中性，若澄清直接檢測，若渾濁則 8000rpm，4℃離心 5min 后取上清液測定，此時整個上清液體積記為 V3。 2、上機(jī)檢測： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長到 340nm。本試劑盒僅供科研使用 2 ② 在 96 孔板中依次加入：試劑名稱（μL）測定管樣本 10 試劑一 10 試劑二 10 試劑三 160 混勻，室溫（25℃）下，5min后于340nm 處讀取A1值。試劑四 10 混勻，室溫（25℃）下，反應(yīng)15min 于340nm處讀取A2值，ΔA=A2-A1。【注】若ΔA 差值在零附近，可增加樣本量 V1（如 40μL，則試劑三相應(yīng)減少）。則改變后的 V1 需代入公式重新計算。五、結(jié)果計算： 1、按樣本鮮重計算： ATP 含量(μmol/g 鮮重)=[ΔA÷(ε×d)×V2×106]÷(W×V1÷V)=6.35×ΔA÷W 2、按細(xì)菌/細(xì)胞密度計算： ATP 含量(μmol/104 cell)=[ΔA÷(ε×d)×V2×106]÷(500×V1÷V)=0.013×ΔA 3、液體中 ATP 含量計算： ATP 含量(μmol/mL)=[ΔA÷(ε×d)×V2×106]÷V1=6.35×ΔA 4、高蛋白樣本中 ATP 含量計算： ATP 含量(μmol/g 鮮重)=[ΔA÷(ε×d)×V2×106]÷(W×V1÷V)=6.35×ΔA÷W ATP 含量(μmol/g 鮮重)=[ΔA÷(ε×d)×V2×106]÷(W×V1÷V3)=6.35×ΔA÷V3÷W ε---NADPH的摩爾吸光系數(shù)為6.3×103L/mol/cm； d---光徑距離，0.5cm； V---提取液體積，1mL； V1---樣本體積，10μL=0.01mL； V2---反應(yīng)總體積，200μL=2×10-4L； ATP分子量---551.14； V3---高蛋白組織樣本最終上清液總體積，mL； W---樣本質(zhì)量，g; 檢測線范圍---0.06μmol/mL-4μmol/mL。