北京華科盛精細化工產(chǎn)品貿(mào)易有限公司生產(chǎn)銷售草酸銨結(jié)晶紫染色液：

中文名

草酸銨

外文名

ammonium oxalate

性    質(zhì)

溶于水，微溶于乙醇

 分子式

 (NH4)2C2O4

相對分子量

124.10

1．在96孔細胞培養(yǎng)板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-164細胞的培養(yǎng)液（含10%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液），37℃ 5% CO2的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2～3小時，讓細胞帖壁。

2．用RPMI-1640培養(yǎng)液10倍遞次稀釋TNF標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)需要3～5倍遞次稀釋待檢樣品，每孔加0.1ml稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品或待檢樣品，每個稀釋度3個重復(fù)孔。對照孔6個，3個陽性對照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培養(yǎng)液，3個陰性對照孔各加100μl RPMI-1640培養(yǎng)液。繼續(xù)培養(yǎng)18～24小時。

3．甩去培養(yǎng)液，用PBS小心洗滌一次，每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定細胞30秒鐘。

4．吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml結(jié)晶紫染液，室溫中放置20分鐘。

5．輕輕甩去染色液，用蒸餾水洗滌各孔，將培養(yǎng)板倒置于吸水紙上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室溫中長期保存。草酸銨結(jié)晶紫染色液