圖：桿狀病毒人工合成的工作原理示意圖（A）及病毒電鏡觀察（B）

ELISA試劑廠家-齊一生物

合成生物學(xué)技術(shù)作為 21 世紀(jì)的一門新興生物學(xué)技術(shù)，推動(dòng)了生命科學(xué)乃至整個(gè)自然科學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展。病毒的人工合成為深入揭示病毒的本質(zhì)和功能，以及病毒的遺傳改造提供了強(qiáng)有力的工具。以往，對(duì)病毒人工合成的探索主要集中在 RNA 病毒上，而目前已知zui大的 RNA 病毒基因組也僅有~30 kb。迄今為止，所報(bào)道成功合成的 DNA 病毒zui大不超過(guò) 6 kb。桿狀病毒是一類大的雙鏈 DNA 病毒（基因組大小 80-180 kb），在生物藥、真核表達(dá)系統(tǒng)等領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價(jià)值。近期，中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所研究員胡志紅課題組聯(lián)合運(yùn)用 PCR 及酵母轉(zhuǎn)化相關(guān)的同源重組（Transformation Associated Recombination, TAR）技術(shù)，合成了桿狀病毒模式種 AcMNPV 的全基因組，并通過(guò)轉(zhuǎn)染細(xì)胞成功拯救出了有感染性的人工合成病毒。

研究人員首先利用 PCR 擴(kuò)增覆蓋 AcMNPV 全基因的~45 個(gè)片段，每個(gè)片段約 3kb，相鄰片段之間有大于 60 bp 的重疊序列。然后利用 TAR 技術(shù)，在酵母細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行了三次重組，依次獲得了 9 個(gè)~15 kb 的片段、3 個(gè)~45 kb 的片段和全基因組（145,299 bp）。將合成的病毒基因組進(jìn)行了 454 測(cè)序驗(yàn)證，通過(guò)轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞成功獲得了有感染性的人工合成病毒 AcMNPV-WIV-Syn1（圖 A）。電鏡、一步生長(zhǎng)曲線和生物測(cè)定等結(jié)果表明，合成病毒與親本病毒具有相似的生物學(xué)特性（圖 B）。

該技術(shù)的建立，不僅為桿狀病毒的基礎(chǔ)研究提供了有力工具，還可以用于改良桿狀病毒的表達(dá)系統(tǒng)和殺蟲性能。該研究是大 DNA 病毒研究領(lǐng)域的重要突破，被審稿人認(rèn)為“this is a highly significant paper that will serve as a landmark in synthetic biology”。