植物全氮(粗蛋白)含量試劑盒資料
一．試劑配制

植物全氮(粗蛋白)含量試劑盒資料1、標(biāo)準(zhǔn)溶液

鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液[c (HCl)=0.1000 mol/L]，移取 9 mL 濃鹽酸（鹽酸濃度 36%～38%）用蒸餾水

稀釋并定容至 1000 mL 容量瓶，搖勻，用無(wú)水碳酸鈉進(jìn)行標(biāo)定。

無(wú)水碳酸鈉標(biāo)定方法：取 50mL 蒸餾水，加入 10 滴溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，用配置好

的鹽酸溶液滴定至溶液由變?yōu)榘导t色，消耗鹽酸體積記為 V0；再準(zhǔn)確稱取經(jīng) 300℃烘干 1小時(shí)的無(wú)水碳酸鈉 0.2g，至 0.0001，記為 m，溶于少量蒸餾水中定容至 50mL，加入 10滴溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，用配置好的鹽酸溶液滴定至溶液由綠色變?yōu)榘导t色，煮沸3 分鐘，冷卻后繼續(xù)滴定至溶液呈暗紅色，消耗鹽酸體積記為 V。

C（HCl）=m/[(V-V0)*0.05299],其中 C（HCl）單位為 mol/L。

2、40%氫氧化鈉溶液 1000 ml（400 g/L）

400g 氫氧化鈉溶解于 1000mL 無(wú)氨蒸餾水中；

3、2%濃度硼酸溶液 2000 ml （20g/L）

分析純硼酸 40g 溶于 2000ml 無(wú)氨蒸餾水中；

4、甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑

A：稱取 0.1g 甲基紅，用無(wú)水乙醇定容至 100 ml；

B：稱取 0.1g 溴甲酚綠，用無(wú)水乙醇定容至 100 ml.

臨用時(shí)按照 A:B=1:5 混勻。取 10ml 加入 1000ml 硼酸溶液中。

5、高錳酸鉀溶液：2.5g 高錳酸鉀溶于 50mL 蒸餾水中。

6、1:1 硫酸溶液：100mL 濃硫酸緩慢加入 100ml 蒸餾水中，邊加邊攪拌。

植物全氮(粗蛋白)含量試劑盒資料二．樣品消解

1.將植物樣本粉碎，80℃烘干至恒重，過(guò) 40 目篩，稱取約 0.3g，加入消化管中，同時(shí)取空消化管兩支，用移液管分別往每管中加入 10mL 濃硫酸，輕輕晃動(dòng)消化管。

2.將 20 支消化管全部置于石墨消解儀上，蓋好蓋子，打開(kāi)廢氣回收系統(tǒng)以及石墨消解儀，溫度設(shè)置為：曲線加熱 100℃，10min；280℃，10min；400℃，40min。

3.取出消化管冷卻至室溫，切勿在樣品冷卻之前開(kāi)蓋。每支消化管中緩慢加入 1mL 過(guò)氧化氫，搖勻，重新放置在石墨消解儀上，溫度設(shè)置為：曲線加熱 200℃，10min；320℃，30min；400℃，30min。

4. 取出消化管冷卻至室溫，切勿在樣品冷卻之前開(kāi)蓋。每支消化管中緩慢加入 0.5mL 過(guò)氧

化氫，搖勻，重新放置在石墨消解儀上，溫度設(shè)置為：曲線加熱 200℃，10min；320℃，30min；

400℃，60min。若樣本未呈現(xiàn)澄清狀態(tài)，應(yīng)繼續(xù)加熱至澄清，即消解*。

5. 關(guān)閉石墨消解儀，待樣品冷卻后關(guān)掉廢氣回收系統(tǒng)。

三．全氮測(cè)定

1.將滴定酸桶，硼酸桶，堿桶，蒸餾水桶管路按照標(biāo)示插好（滴定酸桶的管子應(yīng)插到底部），將硼酸桶，堿桶，蒸餾水桶的液位檢測(cè)插好。

2.打開(kāi)定氮儀與循環(huán)水系統(tǒng)，進(jìn)入清洗界面，行兩次硼酸清洗管路，再進(jìn)行一次換酸清洗，一次堿管路清洗。

3.裝一只空的消化管，關(guān)好防護(hù)門(mén)。點(diǎn)擊【測(cè)試】菜單系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)入操作模式界面，選擇【自

動(dòng)測(cè)試】，常規(guī)，設(shè)置參數(shù)為：樣品編號(hào)；樣品重量：0.000g。滴定酸濃度：標(biāo)定好的鹽酸濃度(mol/L)；空白值：0.000mL；蛋白系數(shù)：樣品固定的轉(zhuǎn)換系數(shù)。硼酸：15ml；稀釋水：20mL；堿液：0mL；蒸餾：5min；設(shè)置完成后，點(diǎn)擊【確定】即可進(jìn)入自動(dòng)測(cè)試功能。

4.測(cè)試完成后打印測(cè)定結(jié)果。

5.打開(kāi)安全門(mén)，戴棉質(zhì)手套取出消化管，放入樣品空白管，關(guān)好防護(hù)門(mén)。點(diǎn)擊【測(cè)試】菜單系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)入操作模式界面，選擇【自動(dòng)測(cè)試】，常規(guī)，堿液參數(shù)設(shè)置為 40mL，其余參數(shù)同步驟 3，重復(fù)步驟 3。

6.樣品測(cè)定：設(shè)置參數(shù)為：樣品編號(hào)；樣品重量：稱取的樣品實(shí)際質(zhì)量，g。滴定酸濃度：標(biāo)定好的鹽酸濃度(mol/L)；空白值：兩支空白管滴定用酸量的平均值，mL；蛋白系數(shù)：樣品固定的轉(zhuǎn)換系數(shù)。硼酸：15ml；稀釋水：20mL；堿液：40mL；蒸餾：5min；設(shè)置完成后，點(diǎn)擊【確定】即可進(jìn)入自動(dòng)測(cè)試功能。

7.測(cè)試完成后打印測(cè)定結(jié)果。

8.進(jìn)行儀器清洗，然后關(guān)閉循環(huán)水系統(tǒng)及定氮儀，然后清潔儀器。

植物全氮(粗蛋白)含量試劑盒資料四．注意事項(xiàng)

1.禁止使用邊緣有缺口，或者有裂縫的消化管進(jìn)行消解，消解時(shí)蓋子放置好，以免廢氣泄露，消解儀工作狀態(tài)盡量不要靠近儀器，但是要經(jīng)常觀察管內(nèi)變化，若出現(xiàn)異常情況，立即斷電。

2.開(kāi)始蒸餾時(shí)，消化管中液體的總體積以不超過(guò)總體積的1/3。

3.拿取消化管時(shí)，注意高溫燙傷。放置消化管時(shí)，左右旋轉(zhuǎn)幾下，確保消化管與蒸餾頭密封。

4.每日做完實(shí)驗(yàn)要用洗瓶沖洗蒸餾頭殘余堿液，儀器前部的槽皿中，如果積有液體，請(qǐng)擦洗干凈。

5.為了延長(zhǎng)防濺裝置的使用壽命，請(qǐng)每天工作結(jié)束后清洗兩次左右：即消化管加水 150mL

空蒸 5 分鐘。（空蒸儀器把加堿量設(shè)置為“0”）。

6.  關(guān)機(jī)前，需將接收杯內(nèi)液體排凈，儀器使用結(jié)束后要關(guān)閉水源、電源，儀器上要放置一

空消化管（防止防濺裝置內(nèi)殘留液體流到儀器上）。

7.  做完實(shí)驗(yàn)將消解管清洗干凈（包括壁內(nèi)和壁外），然后放烘箱烘干，烘干后若長(zhǎng)時(shí)不用則

收起來(lái)。消解儀各部位上若有硫酸殘留需及時(shí)擦拭干凈一面被腐蝕，消解儀蓋子以及托盤(pán)需長(zhǎng)清洗保持潔凈。