人慢性骨髓性白血病細(xì)胞系 K562齊一生物科技（上海）有限公司產(chǎn)品已被廣泛應(yīng)用于化學(xué)、化工、生命科學(xué)的基礎(chǔ)研究和開(kāi)發(fā)應(yīng)用、制藥、疾病診斷與控制、人口與健康、生物技術(shù)等諸多領(lǐng)域.客戶遍布國(guó)內(nèi)各大學(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生防疫、商品檢驗(yàn)檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位.齊一生物科技（上海）有限公司：.Web:www.qiyibio。。ｃｏｍ

人慢性骨髓性白血病細(xì)胞系 K562細(xì)胞培養(yǎng)方法 
1、收到細(xì)胞，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快。
2、收到細(xì)胞，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況 ，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時(shí)之需。
5 、24小時(shí)后，細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，就可以傳代了。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn)）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的*消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般1-3分鐘，不超過(guò)5分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái)，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀，有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
6，貼壁細(xì)胞 ，懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí)，換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37度    5%CO2 培養(yǎng)
7.  收到細(xì)胞后，請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ，血清濃度還是在10％。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基（含：必需與非必需氨基酸、維他命、有機(jī)與無(wú)機(jī)成分、激素、生長(zhǎng)因子與微量元素）、細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、抗生素/抗菌素溶液或*/*（P/S）溶液、FBS，適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用

一、細(xì)胞操作參考書(shū)
二、生長(zhǎng)特性：貼壁    懸浮
三、細(xì)胞生長(zhǎng)條件：
培養(yǎng)基                  90%              （GIBCO）
血清              10%  FBS（GIBCO）
溫度                       37℃
空氣條件      5% CO2，,95% AIR
生長(zhǎng)代數(shù)    P4
凍存條件    培養(yǎng)基70%、血清20%、DMSO10%
四、組成：
組份    規(guī)格
細(xì)胞一瓶    T25
細(xì)胞培養(yǎng)與操作說(shuō)明    1份
五、細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基，培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)實(shí)驗(yàn)室，技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決
2.貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢：適當(dāng)提高血清濃度（zui高不能超過(guò)20%），或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度，考慮*消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3.生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

六、細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）
1．吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml  0.25%*進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?-2min）
2．鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ?，加6~8ml *培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散
3．取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4．注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存
特別注意：（如使用公共實(shí)驗(yàn)室或初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)）
1.收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間zui長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí)）
2.貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞放置培養(yǎng)箱孵育過(guò)夜到第二天再做消化傳代
如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并實(shí)驗(yàn)室
選擇齊一生物的原因：
1.供貨及時(shí)。我們訂貨周期短，運(yùn)輸時(shí)間短，在zui短時(shí)間內(nèi)為您提供所需產(chǎn)品。
2.*：美國(guó)ATCC的中國(guó)代理商，沒(méi)有中間環(huán)節(jié)。在國(guó)內(nèi)我們保證。
3.服務(wù)保障：我們擁有的技術(shù)指導(dǎo)團(tuán)隊(duì)，對(duì)每售出的一件產(chǎn)品，提供全面的售前、售中和售后服務(wù)。
4.產(chǎn)品種類齊全：25個(gè)系統(tǒng)共150多種細(xì)胞以及各類菌株，滿足不同客戶的要求。細(xì)胞經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控，純度可達(dá)98％。常用產(chǎn)品備有現(xiàn)貨。其產(chǎn)品類型如下：消化系統(tǒng)細(xì)胞株，呼吸系統(tǒng)細(xì)胞株，泌尿系統(tǒng)細(xì)胞株生殖系統(tǒng)細(xì)胞株 血液循環(huán)系統(tǒng) 內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞株 神經(jīng)系統(tǒng)及其他細(xì)胞株，動(dòng)物細(xì)胞株和菌株
5.對(duì)于部分難培養(yǎng)的細(xì)胞我公司可代復(fù)蘇細(xì)胞，并提供。
6.經(jīng)驗(yàn)豐富：我公司是國(guó)內(nèi)專業(yè)化的細(xì)胞銷售公司，具有十余年細(xì)胞產(chǎn)品銷售經(jīng)驗(yàn)，有專業(yè)的銷售團(tuán)隊(duì)和技術(shù)人員。公司的每一位員工都將竭誠(chéng)為您服務(wù)。
7.質(zhì)量保證，保證售后
Aniline blue,alcohol soluble 苯胺藍(lán)醇溶    [8004-91-9]
Aniline blue, water soluble 苯胺藍(lán)(水溶)    [28631-66-5]
Ruthenium Red 釕紅    [11103-72-3]
Azure B 天青B    [531-55-5]
Azelaic acid 壬二酸    [123-99-9]
Aflatoxin G1 G1    [1165-39-5]
Aflatoxin G2 G2    [7241-98-7]
Aflatoxin M1 from Aspergillus flavus M1    [6795-23-9]
Agarose SFRTM 瓊脂糖 SFRTM    [9012-36-6]
Agarose SFRTM 瓊脂糖 SFRTM    [9012-36-6]
Agarose 3:1 HRBTM 瓊脂糖3:1 HRBTM    [9012-36-6]
Agarose 3:1 HRBTM 瓊脂糖3:1 HRBTM    [9012-36-6]
Agarose ITM 瓊脂糖 ITM    [9012-36-6]
Agarose ITM 瓊脂糖 ITM    [9012-36-6]
Allura red 誘惑紅    [25956-17-6]
Ethyl red 乙基紅    [76058-33-8]
BPDA 聯(lián)苯二酐    [2420-87-3]
Agarose IIITM 瓊脂糖 IIITM    [9012-36-6]
Agarose IIITM 瓊脂糖 IIITM    [9012-36-6]
Agarose IVTM 瓊脂糖 IVTM    [9012-36-6]
BCA, disodium salt 2,2’-聯(lián)喹啉-4,4’-二羧酸二鈉    [979-88-4]
Benzil 聯(lián)苯甲酰    [134-81-6]
Agarose IVTM 瓊脂糖 IVTM    [9012-36-6]
Agarose B, Low EEO 瓊脂糖    [9012-36-6]
Agarose B, Low EEO 瓊脂糖    [9012-36-6]
Agarose H 瓊脂糖H    [9012-36-6]
Agarose H 瓊脂糖H    [9012-36-6]
Agarose, Low melting 低熔點(diǎn)瓊脂糖    [9012-36-6]
Agarose, Low melting 低熔點(diǎn)瓊脂糖    [9012-36-6]
Benzimidazole 苯并咪唑    [51-17-2]
Benzopurpurine 4B 苯紅紫4B    [992-59-6]
BAEE 苯甲酰-L-*乙酯鹽酸鹽    [2645-08-1]
Alcian yellow 阿利新黃GXS()    [61968-76-1]
Ala-Gln 丙谷二肽    [39537-23-0]
β-Alanine β-*    [107-95-9]
D-Alanine D-*    [338-69-2]
DL-Alanine DL-*    [302-72-7]
L-Alanine L-*    [56-41-7]
L-Alanine L-*    [56-41-7]
DL-Alaninol DL-氨基丙醇    [6168-72-5]
Albumin, from bovine Cohn fraction V pH 5.2 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, from bovine pH 7.0 Fatty free 無(wú)脂肪酸牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, from bovine Protease free 無(wú)蛋白酶牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin 低內(nèi)毒素牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, cold alcohol isolation 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, cold alcohol isolation 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Methyl red sodium salt 甲基紅鈉    [845-10-3]
Albumin, bovine, fraction V, cold alcohol isolation 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, heat shock isolation pH 7.0 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, heat shock isolation pH 7.0 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, heat shock isolation pH 7.0 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, heat shock isolation pH 7.0 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, heat shock isolation pH 7.0 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
小鼠分泌型磷脂酶A2（sPLA2)ELISA 試劑盒
小鼠總補(bǔ)體(CH50)ELISA 試劑盒
小鼠酸性粒細(xì)胞趨化因子(eotaxin)ELISA 試劑盒
小鼠毒蕈堿型乙酰*受體亞型M1（M-AChRM1)ELISA 試劑盒
小鼠毒蕈堿型乙酰*受體亞型M2(M-AChRM2)ELISA 試劑盒
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA 試劑盒 
小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA 試劑盒 
小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA 試劑盒 
小鼠磷脂酰*(PS)ELISA 試劑盒 
小鼠*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA 試劑盒 
小鼠β-防御素(β-DF)ELISA 試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA 試劑盒 
小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA 試劑盒 
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA 試劑盒 
小鼠*/*蛋白磷酸酶(STK)ELISA 試劑盒 
小鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA 試劑盒 
小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA 試劑盒 
小鼠CD19分子(CD19)ELISA 試劑盒 
小鼠CD3分子(CD3)ELISA 試劑盒 
小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA 試劑盒 
小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA 試劑盒 
小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA 試劑盒 
小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒 
小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA 試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA 試劑盒 
小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA 試劑盒 
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA 試劑盒 
小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA 試劑盒 
小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA 試劑盒 
小鼠磷脂酰*(PS)ELISA 試劑盒 
小鼠*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA 試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA 試劑盒 
小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA 試劑盒 
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA 試劑盒 
小鼠*/*蛋白磷酸酶(STK)ELISA 試劑盒 
小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒 
小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA 試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA 試劑盒 
小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA 試劑盒 
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA 試劑盒 
小鼠抗核抗體(ANA)ELISA 試劑盒 
小鼠鑰孔蟲(chóng)戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISA 試劑盒 
小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA 試劑盒 
小鼠氧化型*(GSSG)ELISA 試劑盒 
小鼠還原型*(GSH)ELISA 試劑盒 
小鼠c-fos ELISA 試劑盒 
小鼠c-jun ELISA 試劑盒 
小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISA 試劑盒 
小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA 試劑盒