人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒
英文名稱: Human Rotavirus,RV IgM ELISA KIT
上海勝隆除了出售
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人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒實驗目的
1.深入了解ELISA 法測定抗體效價的原理。
2.掌握ELISA 法測定單克隆抗體效價的方法。
二、實驗原理
ELISA 是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。
免疫酶技術(shù)是將酶標記在抗體/抗原分子上,形成酶標抗體/酶標抗原,稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反應后,作用于底物使之呈色,
根據(jù)顏色的有無和深淺,定位或定量抗原/抗體。ELISA 法是免疫酶技術(shù)的一種,其特點是利用聚苯乙烯微量反應板(或球)吸附抗原/抗體,
使之固相化,免疫反應和酶促反應都在其中進行。在每次反應后都要反復洗滌,這既保證了反應的定量關系,也避免了末反應的游離抗體/抗原的分離步驟。
在ELISA 法中.酶促反應只進行一次,而抗原、抗體的免疫反應可進行一次或數(shù)次,即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進行免疫反應。
目前常用的幾種ELISA 方法有:測定抗體的間接法,測定抗原的雙抗體夾心法和測定抗原的競爭法等。本實驗采用間接法測定單克隆抗體效價。其主要過程為:
首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應板的凹孔內(nèi),加待測抗體,保溫后洗滌以除去未結(jié)合的雜蛋白質(zhì),加酶標抗抗體,保溫后洗滌,加底物保溫30分鐘后,
加酸或堿終止酶促反應,用目測或光電比色測定抗體含量。
外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過久、標本凝集不全和*中添加物等影響。
人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒