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人胰淀素(Amylin)ELISA Kit說明書

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更新時間:2015-03-28 10:49:56瀏覽次數(shù):153次

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ELISA小常識:ELISA試驗條件固相載體的選擇:載體的種類比較多,其中包括纖維素、交聯(lián)右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。從使用形式上可有凹孔平板、試管、珠粒等。聚苯乙烯凹孔板是應(yīng)用zui廣泛的一種載體。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好,操作簡便、用量小,適于大批檢查。由于聚苯乙烯的工藝過程不是很穩(wěn)定,造成各批次差異比較大。所以進行ELISA之前,必須進行篩選。檢查方法:⑴ 吸附性能的檢查:先加抗體包被,然后加入同一稀釋度的酶標抗體,zui后加底物、顯色、測OD值,求出總平均OD值,再求出每相鄰兩孔的OD平均值,此均值在總均值的±10%以內(nèi)為合格,若中間孔與四周孔OD值相差太大,或一側(cè)與另一側(cè)孔OD值相差較大均屬不合格。⑵ 對比測定陽性血清與陰性血清,觀察是否存在明顯差異,若二者OD值相差于10倍以上者為合格。板的處理。新板一般不用處理,用蒸餾水沖洗即可應(yīng)用。板用一次即廢。但不少實驗工作者認為用超聲波處理,清潔液Tritonx100、20%乙二醇處理仍可應(yīng)用。但發(fā)現(xiàn)空白對照顯色較深和陽性樣品顯色結(jié)果不理想時,應(yīng)放棄不用。

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ELISA實驗操作注意事項:
大部分實驗室在使用酶標儀之前是通過目測判斷結(jié)果,操作過程隨意性較大,在使用酶標儀后操作必須規(guī)范:
A. 使用移液器加液,移液槍頭不能混用。
B. 洗板要干凈,避免交叉污染。
C. 嚴格按照試劑盒的說明書操作,反應(yīng)時間準確。
D. 請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成注意做好清潔工作。
E. 不要在測量過程中關(guān)閉電源。
F. 對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差,應(yīng)根據(jù)實際情況及時修改參數(shù),以達到*效果。
G. 使用后蓋好防塵罩。
H. 出現(xiàn)技術(shù)故障時應(yīng)及時與廠家,切勿擅自拆卸酶標儀。


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