人抗浦肯野細胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA Kit說明書
ELISA小常識:ELISA試驗條件固相載體的選擇:載體的種類比較多,其中包括纖維素、交聯(lián)右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。從使用形式上可有凹孔平板、試管、珠粒等。聚苯乙烯凹孔板是應用zui廣泛的一種載體。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好,操作簡便、用量小,適于大批檢查。由于聚苯乙烯的工藝過程不是很穩(wěn)定,造成各批次差異比較大。所以進行ELISA之前,必須進行篩選。檢查方法:⑴ 吸附性能的檢查:先加抗體包被,然后加入同一稀釋度的酶標抗體,zui后加底物、顯色、測OD值,求出總平均OD值,再求出每相鄰兩孔的OD平均值,此均值在總均值的±10%以內(nèi)為合格,若中間孔與四周孔OD值相差太大,或一側與另一側孔OD值相差較大均屬不合格。⑵ 對比測定陽性血清與陰性血清,觀察是否存在明顯差異,若二者OD值相差于10倍以上者為合格。板的處理。新板一般不用處理,用蒸餾水沖洗即可應用。板用一次即廢。但不少實驗工作者認為用超聲波處理,清潔液Tritonx100、20%乙二醇處理仍可應用。但發(fā)現(xiàn)空白對照顯色較深和陽性樣品顯色結果不理想時,應放棄不用。
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ELISA小常識:
抗HIV-ELISA試劑目前對HIV的檢測原料有了較大改進,主要如下:
(1)可用于檢測血清或血漿中HIV IgM亞特異性抗體和檢測HIV-1、2和多種亞型。
(2)標記的抗原:a.含HIV-1B亞型gp41和P24的HIV-1重組融合蛋白。b.可特異性檢測血清或血漿中HIV M群的抗體,絕大多數(shù)HIV-1.0群和HIV-2群的抗體。c.gp36免疫調(diào)控區(qū)的HIV-2多肽可測定特異性的HIV-2抗體。d.gp41的倆段HIV 1.0群多肽,可測特異性HIV 1.0 群的抗體 和HIV 1M群的抗體。HIV-1.0.2對759份各類臨床樣品包括401份HIV-1感染不同階段病人樣品,204分HIV-2感染不同階段病人樣品,和154份與HIV無關的其他疾病患者的樣品的檢測結果。特異性:99.93% 靈敏度:*
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