山梨-醇含量測試盒_糖代謝系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意 :正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
山梨-醇廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,不僅是糖運(yùn)輸形式之一,而且與生物抗逆性和食物風(fēng)味密切相關(guān)。因此,在糖代謝、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測山梨-醇含量變化。
山梨-醇含量測試盒_糖代謝系列
測定原理:
山梨-醇在堿性溶液中與銅離子形成藍(lán)色絡(luò)合物,在655nm波長有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體10mL×1瓶 ,4℃保存。
山梨-醇的提?。?br/>
按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.2g組織,加入2mL蒸餾水),研磨成勻漿, 95℃水浴10分鐘(蓋緊,以防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清液待測。
山梨-醇含量計(jì)算:
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 0.352x - 0.002;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、按照樣本質(zhì)量計(jì)算
山梨-醇含量(mg /g 鮮重)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA+0.002) ÷W
3、按照樣本蛋白濃度計(jì)算
山梨-醇含量(mg /mg prot)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA+0.002) ÷Cpr
V1:加入樣本體積,1mL;V2:加入提取液體積,2 mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,
g
注意:
-低檢測限為1μg/g鮮重或0.01μg /mg prot