山梨-醇脫氫酶(SH)測試盒_糖代謝系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意 :正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
SH(EC 1.1.1.14)催化山梨-醇脫氫生成果糖,是調(diào)控生物體內(nèi)山梨-醇含量的關(guān)健酶之一。
山梨-醇脫氫酶(SH)測試盒_糖代謝系列
測定原理:
SH催化山梨-醇脫氫生成果糖,同時還原NAD+生成NADH,測定340nm吸光度增加速率可以計(jì)算SH活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前每瓶加入15mL蒸餾水,用不完的試劑仍4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前每瓶加入15mL蒸餾水,用不完的試劑仍-20℃保存。
粗酶液提?。?br/>
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。