麥芽糖含量測試盒_糖代謝系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
注 意:正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
麥芽糖是由兩個葡萄糖單位經(jīng)由α-1,4 糖苷鍵連接而成的二糖,又稱麥芽二糖。麥芽糖是淀粉、糖原、糊精等大分子多糖類物質(zhì)在β-淀-粉酶催化下的主要水解產(chǎn)物,再經(jīng)麥芽糖酶催化,則被水解成兩個葡萄糖分子。麥芽糖不僅參與了生物體內(nèi)糖代謝,其在食品和醫(yī)藥工業(yè)等行業(yè)也著廣泛應(yīng)用,是產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一。
測定原理:
麥芽糖酶將樣品中麥芽糖水解為葡萄糖; 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化 4-氨基安替-比林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在 505 nm 有特征吸收峰。
麥芽糖含量測試盒_糖代謝系列
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽和蒸餾水
試劑的組成和配制:
試劑一:液體 35mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加 3 mL 試劑一溶解后待用,用不完的試劑分裝后-20℃保存;
試劑三:液體 25ml×1 瓶,4℃保存;
試劑四:液體 25ml×1 瓶,4℃保存;
麥芽糖提取:
按照樣本質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一),研磨成勻漿,95℃水浴 10 分鐘(蓋緊,防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心 10min,取上清液備用。
測定步驟:
1、 分光光度計預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 505nm,蒸餾水調(diào)零
2、 混合試劑的配制:使用前將試劑三和試劑四 1:1 等體積混合,用多少配多少。
3、 測定管:取 200μL 上清,加入 100μL 試劑二,混勻,55℃反應(yīng) 60 min,待測。
對照管:取 200μL 上清,加入 100μL 試劑一,混勻,55℃反應(yīng) 60 min,待測。