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更新時間:2018-05-08 00:41:18瀏覽次數:143次
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人腎上腺皮質腺癌細胞,NCI-H295R進口細胞基本特性
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性:人腎上腺皮質腺癌細胞,NCI-H295R細胞. 該細胞系源于多能腎上腺皮質癌細胞系NCI-H295,后者由Gazdar
AF等建立,從腎上腺皮質的腫瘤中分離而來。NCI-H295細胞經改變培養(yǎng)條件獲得了NCI-295R細胞,群體倍增時間從原來的5天減為2天。NCI-295細胞懸浮生長,而NCI-H295R呈單層貼壁生長。NCI-H295R細胞保留了產生雄激素的能力,對血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應。
培養(yǎng)條件:DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES,
with NEAA Medium) Nu-Serum I, 2.5%;15 mM HEPES+0.00625 mg/ml insulin+0.00625
mg/ml transferrin+6.25 ng/ml selenium+1.25 mg/ml bovine serum albumin+0.00535
mg/ml linoleic acid
傳代方法:1:3~1:4傳代;每周換液2~3次。
傳代情況:C3
凍存條件:基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測:培養(yǎng)法(-)
STR:Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:13;D16S539:11;D18S51:17;D19S433:13;D21S11:32.2;D2S1338:25;D3S1358:15,16;D5S818:12;D7S820:9,12;D8S1179:13;FGA:19.2,24;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:17,18;
染色體:
使用權限:A類
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客戶收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
操作臺的滅菌處理:
1)無菌室及無菌操作臺(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘。
2)細胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。 (注:實驗操作應在抬面之*無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。)
培養(yǎng)細胞將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內,將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細胞情況而定。
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