實(shí)驗(yàn)步驟

1. *的提取

取已發(fā)芽的水稻或小麥種子（幼芽長(zhǎng)3～4cm）20粒，放在研缽 中研磨，勻漿用100ml水分多次沖洗，集中于150ml三角瓶并充分?jǐn)嚢?、靜置1小時(shí)后，過(guò)濾入另一三角瓶，濾液中即含有*，若要短期保存時(shí)，可加甲苯數(shù)滴防腐，并放入冰箱中。ELISA試劑盒

2. 溫度對(duì)活性的影響*

取試管5支，分別作15、30、45、60、75℃溫度標(biāo)記，并注明“酶液管",各加入酶提取液5ml；另取5支試管，也分別作15、30、45、60、75℃溫度標(biāo)記，并注明“淀粉液管"，各加入0.5﹪淀粉液5ml；然后各管分別置于相對(duì)應(yīng)溫度的水浴 中，約5min后，待管內(nèi)外溫度一致，將酶液倒入相同溫度的淀粉液管中，搖勻并記下時(shí)間，10min后取出（不同處理之間，時(shí)間要一致），放入冰水中冷卻1min后，往每管加入I－KI溶液5滴，搖勻。觀察顏色有何不同，比較不同溫度對(duì)*活性的影響，判斷zui適宜的酶促作用溫度。

3. pH 對(duì)*活性的影響：

取4支中型試管，分別加入下列系列pH的磷酸鹽－檸檬酸鹽緩沖液3ml，并作標(biāo)記：pH 3.6、4.8、6.0、7.2。每管加入淀粉液3ml和*提取液2ml，充分搖勻，記下時(shí)間，放置30℃左右溫度下20min后，向每管加入I－KI溶液5滴，搖勻，根據(jù)生成的顏色，比較*的活性。

4. 化學(xué)物質(zhì)對(duì)*活性的影響ELISA試劑盒

取6支試管，編上1～6號(hào)，每管加入*提取液1ml及pH5.0醋酸鹽緩沖液1ml，然后往1號(hào)管加蒸餾水1ml（對(duì)照）。2號(hào)管加1％NaCl 1ml，3號(hào)管加1％*1ml，4號(hào)管中加1％CuSO4 1ml，5號(hào)管加0.1％AgNO3 1ml，6號(hào)管加入0.1％HgCl2 （注意，有毒！）1ml，各管再加0.5％淀粉液2ml，搖勻后置于40℃恒溫水浴中，并記錄開(kāi)始時(shí)間，保溫8～10min,取出試管，冷卻后向各管加入I－KI溶液5滴，搖勻，觀察各管顏色的差異。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄及分析ELISA試劑盒

1. 用文字說(shuō)明經(jīng)不同溫度，pH及各種化學(xué)物質(zhì)處理后各試管所顯示的顏色。

2. 用文字簡(jiǎn)要分析環(huán)境條件對(duì)*活性的影響。