HA干擾的消除措施

    由于標(biāo)本中HA的來源是未知的，不能夠準(zhǔn)確的針對HA的結(jié)合位點進(jìn)行操作，目前尚未有一個*消除HA干擾的方法。以下就現(xiàn)有的消除HA的方法進(jìn)行分述。

稀釋法

    如果樣本HA濃度含量不是很高，且它所造成的干擾不是很大時，稀釋法是可以減少它的干擾，但不能*消除。據(jù)報道，稀釋法對使用AxSYM 測定HCG中受到HA的干擾具有很好的消除作用，因為在它的稀釋液中已經(jīng)含有一定量低濃度的動物蛋白來吸附HA。在對其樣本稀釋后，降低了HA的濃度，在低濃度動物蛋白來吸附HA后，原有的干擾強度可明顯減小。

使用異嗜性抗體阻滯劑、阻斷試劑盒或阻斷試管

    目前市場上已經(jīng)有商品化的阻斷劑如：IIR、NS-ABT、HBR、Heteroblock、MAB33 及polyMAB33。將它們加入待測的樣品中，利用非特異性和特異性阻斷劑與HA結(jié)合從而達(dá)到減少干擾的目的。消除干擾的效果通常由干擾物的濃度、類別或亞類，以及阻斷劑的類別和分型所決定。如，奧林巴斯公司在對鐵蛋白檢測時，用F(ab’)2 相關(guān)試劑提前處理待測樣本可在一定程度上消除HA的干擾。異嗜性阻斷試劑盒現(xiàn)在已廣泛使用。其內(nèi)部特制的免疫球蛋白，可用于中和免疫測定法中產(chǎn)生干擾的HA。HA阻斷試劑對預(yù)防假陽性的HCG結(jié)果有很好的效果，但添加鼠免疫球蛋白對預(yù)防假陽性的HCG結(jié)果無影響。又如使用HA阻斷試管。使用貝克曼化學(xué)發(fā)光免疫法測定檢測如游離PSA特異性抗原等項目時，樣本在檢測前用HBT處理，大大減少了假陽性的發(fā)生率。抗體

提取法

    可以采用吸附在氟乙烯表面的鼠McAb，固相結(jié)合在瓊脂糖凝膠柱上的蛋白G或者蛋白A去提取HA的方法、三氟乙酸沉淀法、巰基試劑法、陽離子交換劑和親和層析等方法，均對消除HA有一定效果。但不宜使用熱或酸處理來滅活血清中的HA，因為大多數(shù)的分析物都不穩(wěn)定。

利用活體*單鏈抗體作為捕獲試劑

    使用活體*單鏈抗體作為捕獲抗體用于固相抗原的測定技術(shù)可以在一定程度上有效地避開HA的干擾。將活體*單鏈抗體作為捕獲抗體結(jié)合到固相的抗原上，再加入已經(jīng)用標(biāo)記的親和素結(jié)合到*上，形成固相抗原-活體*單鏈抗體-標(biāo)記親和素復(fù)合物，由于*與親和素的結(jié)合為高度特異的結(jié)合，故可較有效地避開HA的干擾。此外，在活體*單鏈抗體與固相抗原發(fā)生特異性的反應(yīng)結(jié)合過程中，即使樣本里存在有HA，它以Fab-Fab的結(jié)合模式結(jié)合到過剩的*單鏈抗體試劑上，zui終也只能被沖洗清除，從而使測定在一定程度上避開HA的干擾。