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常用的免疫酶染色方法

時(shí)間:2015-7-15閱讀:344
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?  又分為以下兩種方法:
–  酶標(biāo)抗體
?  直接法
?  間接法
–  非標(biāo)記抗體酶法
?  酶橋法
?  PAP法

(1) 酶標(biāo)抗體法
?  通過共價(jià)鍵將酶結(jié)合在抗體上,制成酶標(biāo)抗體,與標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng)后,再用酶組化法將酶顯色,使之生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,以供光鏡和電鏡觀察。
–  優(yōu)點(diǎn):切片能長(zhǎng)期保存、反復(fù)觀察,適于鏡下半定量分析。
–  缺點(diǎn):酶與抗體形成的共價(jià)鍵,可損害抗體和酶的活性;易產(chǎn)生非特異染色。

(2) 酶標(biāo)抗體法——直接法
? 將酶直接標(biāo)記在一抗上,然后直接與相應(yīng)抗原特異地結(jié)合。形成抗原-抗體-酶復(fù)合物,zui后用底物顯色劑顯色。

(3) 酶標(biāo)抗體法——間接法
?  將酶標(biāo)記在二抗上,先將一抗與相應(yīng)的抗原結(jié)合,形成抗原抗體復(fù)合物,再用二抗(酶標(biāo)抗體)與復(fù)合物中的特異抗體結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,zui后用底物顯色劑顯色。
酶標(biāo)抗體間接法的操作步驟
?  標(biāo)本準(zhǔn)備:
–  石蠟脫蠟至水;
–  冰凍切片浸入4?C丙酮固定10min,0.01M PBST漂洗,5min×3;
–  細(xì)胞爬片先用PBS洗,然后4?C丙酮固定10min,再0.01M PBST漂洗,5min×3;
?  石蠟切片需要進(jìn)行抗原修復(fù),其它標(biāo)本則不用;

英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣黏蛋白10(CDH10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣磷蛋白2(CAPS2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣磷蛋白(CAPS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣聯(lián)接蛋白(CLGN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣聯(lián)蛋白(CNX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Mus musculus (Mouse) 鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶B2(ATP2B2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
抗體英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶A2(ATP2A2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Mus musculus (Mouse) 鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶A2(ATP2A2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣結(jié)合蛋白3(CALB3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

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