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講解ELISA試劑盒的正確操作步驟方法

時間:2019/8/27閱讀:6276
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ELISA檢測試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗BP180抗體(BP180-Ab)的含量。如血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
今日,我們主要說明人ELISA檢測試劑盒的正確操作過程:

1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。

3、待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL。

4、隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中(空白孔不加)參與辣根過氧化物酶(HRP)符號的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6、全部孔參與底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7、全部孔參與停止液50μL,15min內(nèi),在450nm波利益測定各孔的OD值。

注意事項:人ELISA檢測試劑盒在2-8℃,運用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這歸于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再運用;實驗中不必的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存;濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本現(xiàn)已稀釋5倍,zui終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度;嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時刻、加液量及次序進(jìn)行溫育操作。全部液體組分運用前充沛搖勻。

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