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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第2年

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科研細(xì)胞
細(xì)胞生物學(xué)試劑

用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基類別和組成成分

時(shí)間:2015/5/25閱讀:317
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緩沖系統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)基  

大多數(shù)細(xì)胞需要的pH值在7.2 -至7.4。但是,不同種類的細(xì)胞需要的PH值也是不一樣的。比如成纖維細(xì)胞喜歡較高pH (7.4至7.7),但是傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH (7.0 至7.4)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠*(NaHCO3)與CO2進(jìn)行緩沖,因此,氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中*濃度一致。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3加入細(xì)胞的量為1.97g/L;如果CO2濃度保持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為3.95g/L。需要細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊,以保證氣體交換.。HEPES是一種非離子緩沖液,在pH 7.2 - 7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,但是價(jià)格比較貴,在高濃度時(shí)可能對(duì)一些細(xì)胞會(huì)有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(0.34g/L)共用,來消除因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。因此在這種條件下培養(yǎng),細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子要擰緊,防止培養(yǎng)液中少量的碳酸鹽揮發(fā)到空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中是加入酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色。

維生素細(xì)胞培養(yǎng)基

在細(xì)胞培養(yǎng)中,盡管血清是維生素重要來源,但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細(xì)胞系生長(zhǎng)。

其它成分細(xì)胞培養(yǎng)基  

在一些比較復(fù)雜的培養(yǎng)液中還包括其它一些成分。例如在雜交瘤技術(shù)中常用的DMEM培養(yǎng)液,使用時(shí)還需要補(bǔ)加丙酮酸鈉和qiu基乙醇。2-Me對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)起到很重要的作用,有人認(rèn)為它相當(dāng)于胎牛血清,有直接刺激細(xì)胞增殖的作用。2-Me的活性部分是硫氫基,其中一個(gè)重要作用是使血清中含硫的化合物還原成*,能誘導(dǎo)細(xì)胞的增殖,為非特異性的激活作用。同時(shí)避免過氧化物對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的損害。另一個(gè)重要作用是促進(jìn)分裂原的反應(yīng)和DNA合成,增加植物凝集素(PHA)對(duì)淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用,已廣泛應(yīng)用于雜交瘤技術(shù)。

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