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免疫細胞化學酶消化液

時間:2015/8/31閱讀:253
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酶消化液

1、0.1%*

試劑:*                  0.1g

   0.1%氯化鈣(pH7.8)   100ml

配制方法:先配制0.1%的CaCl2,用0.1mol/L的NaOH將其pH調至7.8,然后加入蛋白酶溶解之。用前將*消化液在水浴中予熱至37℃(載有標本的玻片也在TBS中予熱至同樣樣溫度)。該消化液時間約為5~30min。細胞

2、0.4%*

試劑:*                  400mg

      0.1N HCl         100ml

配制方法:同*。消化時間在37℃約為30min。細胞

3、0.06% Pronase

試劑:Pronase                0.06g

    0.05mol/L TB(pH7.5)    100ml

配制方法:同前。

在免疫細胞化學染色中,有時經(jīng)Formalin過度固定的標本,常會產生過量的醛基,遮蓋抗原,影響一抗與抗原的結合。用蛋白酶溶液消化,可起到暴露抗原部分的作用。消化時間應根據(jù)不同組織而異,總之,在保持組織形態(tài)不被破壞的前提下,宜盡量延長消化時間。以上三種酶消化液中,以*種zui為常用。

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