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人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒

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更新時間:2018-05-07 23:31:33瀏覽次數(shù):333次

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人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒實驗中我們需要注意一些實驗誤差的問題,下面就是為實驗減少誤差的具體操作步驟:

1.實驗使用前,將所有試劑充分搖勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免在實驗加樣時加入大量的氣泡,實驗時在加樣上產(chǎn)生誤差。

2.根據(jù)待檢測樣品的數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需要使用的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品需根據(jù)自己的數(shù)量來定,如在實驗中能使用復(fù)孔的則盡量做復(fù)孔。

3.將稀釋好后的標準品50ul加入反應(yīng)孔、并加入待測樣品50ul在反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩使其均勻,在37℃的條件下溫育1小時。

4.以上實驗結(jié)束后即甩去孔內(nèi)的液體,每孔均加滿洗滌液,振蕩30秒后,甩去孔內(nèi)的洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)操作3次即可。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)則需增加一次。

5.在每孔中加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩使其搖勻,在37℃的條件下溫育30分鐘。

6.將孔內(nèi)的液體甩去,將每個孔中加滿洗滌液,振蕩30秒后,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

7. 將每個孔中均加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩搖勻,在37℃的條件下溫育10分鐘。注意:避免光照。

8.在取出酶標板時,即迅速加入50ul終止液,加入終止液后立即測定結(jié)果。

9.zui后即在450nm波長處測定各孔的OD值。

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