分子生物學(xué)常用試劑的配制：

1．LB(Luria-Bertani)培養(yǎng)液、平板的配制
配制每升LB培養(yǎng)液，應(yīng)在950ml去離子水中加入：
細(xì)菌培養(yǎng)用酵母提取物（bacto-yeastextract）5g
細(xì)菌培養(yǎng)用胰化蛋白胨（bacto-tryptone）10g
NaCl10g
搖動(dòng)容器直至溶質(zhì)*溶解，用5mol/LNaOH(約0.2ml)調(diào)節(jié)pH值至7.0，加入去離子水至總體積為1L，在151bf/in2(1.034×105Pa)高壓下蒸汽滅菌20min。
L瓊脂平板的配制：
先按上述配方配制液體培養(yǎng)基，臨高壓滅菌前加入瓊脂糖15g/L，同法高壓蒸汽滅菌20min。從高壓滅菌器取出培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)輕輕旋動(dòng)以使熔解的瓊脂糖能均勻分布于整個(gè)培養(yǎng)基溶液中，應(yīng)使培養(yǎng)基降溫至50℃時(shí)，加入抗生素等不耐熱的物質(zhì)。為避免產(chǎn)生氣泡，混勻培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)采取旋動(dòng)的方式，然后可直接從燒瓶中傾出培養(yǎng)基鋪制平板。90mm直徑的培養(yǎng)皿約需30－50ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)基*凝結(jié)后，應(yīng)倒置平皿并貯存于4℃?zhèn)溆谩?/p>

2．瓊脂糖凝膠的配制
根據(jù)所需凝膠的濃度秤取瓊脂糖，加入相應(yīng)電泳緩沖液中，用微波爐加熱煮沸至瓊脂糖*溶解，加入適量E混勻，適當(dāng)冷卻后傾入凝膠鑄槽中，插入梳子，凝膠厚度不超過梳孔，如有氣泡產(chǎn)生則用玻璃棒驅(qū)除，不能過早拔除梳子，應(yīng)待凝膠*凝結(jié)后才能拔除梳子。

3．P1、P2、P3的配制P1的配制：在800ml去離子水中溶入Tri堿6.06g，Na2EDTA?2H2O3.72g，用HCl調(diào)整H至8.0，用去離子水調(diào)整容積至1升，每升P1內(nèi)加入RNaseA100mg。
P2的配制：在950ml去離子水中溶入aOH8.0g，20％SD50ml，調(diào)整容積至1升。
P3的配制：在500ml去離子水中溶入醋酸鉀294.5g，用冰醋酸調(diào)整H值至5.5，用去離子水調(diào)整容積至1升。

4．常用緩沖液：
TE
pH7.4
10mmol/LTris?Cl(pH7.4)
1mmol/LEDTA(pH8.0)
pH7.6
10mmol/LTris?Cl(pH7.6)
1mmol/LEDTA(pH8.0)
pH8.0
10mmol/LTris?Cl(pH8.0)
1mmol/LEDTA(pH8.0)
STE(亦稱TEN)
0.1mmol/LaCl
10mmol/LTris?Cl(pH8.0)
1mmol/LEDTA(pH8.0)
STET
0.1mmol/LaCl
10mmol/LTris?Cl(pH8.0)
1mmol/LEDTA(pH8.0)
5%TritoX-100
TNT
10mmol/LTris?Cl(pH8.0)
150mmol/LaCl
0.05%Twee20
電泳緩沖液
Tris-乙酸（TAE）：50×濃貯存液（每升）：242gTri堿
5 7.1ml冰乙酸
100ml0.5mmol/LEDTA(pH8.0)
使用時(shí)再稀釋50倍。

Tris-磷酸（TPE）：10×濃貯存液（每升）：108gTri堿
15.5ml85％磷酸（1.679g/ml）
40ml0.5mmol/LEDTA(pH8.0)
使用時(shí)再稀釋10倍。

Tris-硼酸（TBE）：5×濃貯存液（每升）：54gTri堿
27.5g硼酸20ml0.5mmol/LEDTA(pH8.0)
使用時(shí)再稀釋10倍。

堿性緩沖液：1×使用液（每升）：5ml10mol/LaOH
2ml0.5mmol/LEDTA(pH8.0)

Tris-甘氨酸：5×濃貯存液（每升）：15.1gTri堿
94g甘氨酸（電泳級(jí)）（pH8.3）
50ml10%SDS（電泳級(jí)）
2×SD凝膠加樣緩沖液
100mmol/LTris?HCl(pH6.8)
200mmol/L二硫蘇糖醇（DTT）
4%SDS（電泳級(jí)）
0.2％溴酚藍(lán)
20％甘油

30％丙烯酰胺：
將29g丙烯酰胺和1gN,N’－亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中，加熱至37℃溶解之，補(bǔ)加
水至終體積為100ml。用Nalgene濾器(0.45孔徑)過濾除菌查證該溶液的pH值應(yīng)不大于7.0，置棕色瓶中
保存于室溫。

10mol/L乙酸銨：
把770g乙酸銨溶解于800ml水中，加水定容至1L后過濾除菌。

1mol/LCaCl2：
在200ml純水中（Milli-Q水或相當(dāng)級(jí)別的水）溶解54gCaCl2?6H2O，用0.22濾器過濾除菌，分裝成10ml小份貯存于－20℃。

2.5mol/LCaCl2：
在20ml蒸餾水中溶解13.5gCaCl2?6H2O，用0.22濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于－20℃。

1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）：
用20ml0.01mol/L乙酸鈉溶液（pH5.2）溶解3.09gDTT，過濾除菌后分裝成1ml小份貯存于－20℃。

0.5mol/LEDTA(pH8.0)：
在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-Na?H2O），在磁力攪拌器上劇烈攪拌，用NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH值至8.0，然后定容至1升，分裝后高壓滅菌備用。

溴化乙錠（10mg/ml）：
在100ml水中加入1g溴化乙錠，磁力攪拌數(shù)小時(shí)以確保其*溶解，然后用鋁箔包裹容器或轉(zhuǎn)移至棕色瓶中，保存于室溫。

1mol/LMgCl2：
在800ml水中溶解203.3gMgCl2?6H2O，用水定容至1升，分裝成小份并高壓滅菌備用。

酚：氯仿：
把酚和氯仿等體積混合后用0.1mol/LTris?Cl(pH7.6)抽提幾次以平衡這一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆蓋等體積的0.01mol/LTris?Cl(pH7.6)液層，保存于4℃。

磷酸緩沖鹽溶液（）：
在800ml蒸餾水中溶解8gaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4，用HCl調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4，加水定容至1升，高壓蒸汽滅菌20min。保存于室溫。

乙酸鉀溶液（用于堿裂解）：
在60ml5mol/L乙酸鉀溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml;水，即成鉀濃度為3mol/L而乙酸根濃度5mol/L的溶液。

3mol/L乙酸鈉(pH5.2和7.0)：
在800ml水中溶解408.1g三水乙酸鈉，用冰乙酸調(diào)節(jié)pH值至5.2或用稀乙酸調(diào)節(jié)pH至7.0，加水定容至1升，分裝后高壓滅菌。

1mol/LTris：
在800ml水中溶解121.1gTris堿，加入濃HCl調(diào)節(jié)pH至所需值。
pHHCl
7.470ml
7.660ml
8.042ml
應(yīng)使溶液冷至室溫后方可zui后調(diào)定pH值，加水定容至1升，分裝后高壓滅菌。

Tri緩沖鹽溶液（T）：
在800ml蒸餾水中溶解8gNaCl、0.2gKCl和3gTris堿，加入0.015酚紅并用HCl調(diào)pH值至7.4，用蒸餾水定容至1升，分裝后在15lbf/in2(1.34×105Pa)高壓下蒸汽滅菌20分鈡，于室溫保存。

5mmol/LNH4Ac溶液：
秤取乙酸銨192.7g，加重蒸水250ml混勻，加重蒸水定容至500ml，1.1kg/cm2滅菌20min。

10mg/mlA（小牛血清白蛋白）溶液：
秤取100mg小牛血清白蛋白溶于10ml滅菌重蒸水中。置4℃冰箱貯存?zhèn)溆谩?/p>

10%十二烷基硫酸鈉（SDS）：
在900ml水中溶解100g電泳級(jí)SDS，加熱至68℃助溶，加入幾滴濃鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.2，加入水定容至1L，分裝備用。