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Western Blot內(nèi)參抗體選擇原則2016/6/20
內(nèi)參抗體種類很多,比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、LaminB等,那么針對自己的實(shí)驗(yàn),我們該如何選擇呢?下面簡單介紹下選擇內(nèi)參抗體應(yīng)遵循的原則:一.樣本種屬來源:首先要考慮的就是...
抑癌蛋白p53如何與基因組結(jié)合?2016/6/20
zui近,來自比利時魯汶大學(xué)的遺傳學(xué)家表明,腫瘤蛋白TP53知道應(yīng)該結(jié)合到我們DNA上的哪個確切位置,來防止癌癥。一旦與這個特定的DNA序列結(jié)合,這個蛋白質(zhì)就可以激活正確的基因來修復(fù)受損的細(xì)胞。相關(guān)研...
更安全的干細(xì)胞培養(yǎng)新方法2016/6/17
人類多能干細(xì)胞(hPSCs)的自我更新和分化能力,使其成為細(xì)胞移植療法、藥物開發(fā)、細(xì)胞分化和發(fā)育研究的一種很有前途的材料來源。然而,這些應(yīng)用所必需的大量細(xì)胞,需要hPSC培養(yǎng)物的大量擴(kuò)增,這個過程與遺...
“改造”免疫系統(tǒng)殺死癌細(xì)胞2016/6/17
在2015年末,美國前總統(tǒng)吉米?卡特宣布,他擴(kuò)散到肝臟和大腦的轉(zhuǎn)移性黑色素瘤已經(jīng)消失。除了手術(shù)和放療之外,卡特還使用一種免疫治療藥物——癌癥治療中一種前景廣闊的新方法。美國圣母大學(xué)化學(xué)家BrianBa...
細(xì)菌的轉(zhuǎn)化與平板篩選2016/6/16
[實(shí)驗(yàn)原理]感受態(tài)是指細(xì)菌處于容易吸收外源DNA的狀態(tài)。轉(zhuǎn)化是指質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)人細(xì)菌的過程。其原理是細(xì)菌處于0℃,CaCl2低滲溶液中,菌細(xì)胞膨脹成球形。轉(zhuǎn)化混合物中的DNA形成...
質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化(CaCl2法)2016/6/16
實(shí)驗(yàn)原理受體細(xì)胞經(jīng)過一些特殊方法如化學(xué)試劑法的處理后,細(xì)胞膜的通透性發(fā)生了暫時性的改變,成為能允許外源DNA分子進(jìn)入的感受態(tài)細(xì)胞。進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子通過復(fù)制,表達(dá)實(shí)現(xiàn)遺傳信息的轉(zhuǎn)移,使受體細(xì)胞出...
RNA提取的操作步驟2016/6/15
RNA的提取準(zhǔn)備試劑:氯仿,異丙醇,75℅乙醇,無RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC處理過的水配制)操作步驟:1.勻漿處理:a.組織將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml...
DNA的瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)原理和方法步驟2016/6/15
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)和掌握瓊脂糖電泳法鑒定DNA的原理和方法。二、實(shí)驗(yàn)原理瓊脂糖凝膠電泳是用于分離、鑒定和提純DNA片段的標(biāo)準(zhǔn)方法。瓊脂糖是從瓊脂中提取的一種多糖,具親水性,但不帶電荷,是一種很好的電泳支...
免疫熒光技術(shù)常見問題與解答2016/6/14
1、問:近期要做免疫熒光雙標(biāo),不知哪位有免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)的詳細(xì)步驟及其注意事項(xiàng)?參考見解:我正在做冰凍組織切片的免疫熒光雙染。我的經(jīng)驗(yàn)是:(1)選取一抗時要來源于兩種不同的動物,我用的是來源于rabb...
常用免疫組織化學(xué)染色方法2016/6/14
(一)、ABC法:(注,下面各種方法,均為手工操作,如沒特別說明,均在室溫下進(jìn)行)1.切片經(jīng)二甲苯Ⅰ5分鐘。2.切片經(jīng)二甲苯Ⅱ5分鐘。3.*Ⅰ30秒。4.*Ⅱ30秒。5.95%酒精Ⅰ30秒。6.95%...
細(xì)胞凋亡檢測技術(shù)與方法2016/6/13
細(xì)胞凋亡(Apoptosis),又稱細(xì)胞程序性死亡(PCD:ProgrammedCellDeath),是指細(xì)胞在一定的理或病理?xiàng)l件下,遵循自身的程序,自己結(jié)束其生命的過程。它是一個主動的,高度有序的,...
常用染料和試劑的配制與使用2016/6/13
1.碘-硫酸法植物細(xì)胞細(xì)胞壁的主要成分是纖維素,纖維素被硫酸水解后,遇碘呈藍(lán)色反應(yīng)。因此用碘-硫酸法可鑒定細(xì)胞壁的成分。試劑配制方法:1%碘液將1.5克碘化鉀溶于100毫升的蒸餾水中,待*溶解后,加入...
微生物細(xì)胞的顯微直接計(jì)數(shù)法2016/6/12
(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私庋蛴?jì)數(shù)板的構(gòu)造、計(jì)數(shù)原理和計(jì)數(shù)方法,用顯微鏡直接測定微生物總細(xì)胞數(shù)。(二)實(shí)驗(yàn)原理測定微生物細(xì)胞數(shù)量的方法很多,通常采用的有顯微直接計(jì)數(shù)法和稀釋平板計(jì)數(shù)法。直接計(jì)數(shù)法適用于各種單細(xì)...
培養(yǎng)基的制備與滅菌2016/6/12
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求:(1)熟悉玻璃器皿的洗滌包裝和滅菌前的準(zhǔn)備工作。(2)學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)基和無菌水的制備,了解培養(yǎng)基配方中各成分的作用、制備流程及各環(huán)節(jié)的操作技術(shù)與應(yīng)用。(3)學(xué)習(xí)并掌握培養(yǎng)基的高壓蒸...
ELISA實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)和技術(shù)疑問2016/6/8
ELISA實(shí)驗(yàn)前的注意事項(xiàng)為了幫助您更好地解決在實(shí)驗(yàn)中可能碰到的各種問題,我們設(shè)計(jì)了這些問題指導(dǎo),配以試劑盒內(nèi)的說明書一起供您參考使用。如果您在實(shí)驗(yàn)中遇到任何暫時無法解決的特殊問題,敬請咨詢,我們將熱...

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