Pollen Viability Test Kit (Peroxidase Assay)

花粉活力檢測(cè)試劑盒（過氧化物酶法）

產(chǎn)品信息

應(yīng)用背景

花粉活力的大小直接影響授粉、受精過程，與植物的產(chǎn)量密切相關(guān)，通過花粉活力的測(cè)定，可了解花粉的可育行，并掌握不育花粉的形態(tài)、生理特征，花粉活力的檢測(cè)方法常用的有：花粉萌發(fā)測(cè)定法、碘-碘化jia（I2-KI）染色法、TTC染色法、過氧化物酶檢測(cè)，MTT、FDA等方法。

產(chǎn)品描述

過氧化物酶（Peroxidase）是常用的花粉活力染色法之一，工作原理在于：花粉中含過氧化物酶。活力高的花粉過氧化物酶活性也高，過氧化物酶與氧化劑（比如：過氧化氫）形成一種復(fù)合物 ，復(fù)合物中的過氧化氫被活化，從而能氧化酚類化合物。根據(jù)顏色變化可判斷花粉的活力。

試劑盒組成

注意事項(xiàng)

1） 本品開蓋后請(qǐng)盡快使用，否則效率會(huì)下降。如果溶液變成紅色，需棄用。

2） TTC染色液對(duì)人體有輕微刺激性，請(qǐng)注意小心防護(hù)；

3） 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

保存與運(yùn)輸方法

保存：-20℃~+4℃保存，具體組分按照標(biāo)簽要求來保存。12個(gè)月有效。

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

操作方法【詳見懋康網(wǎng)站整理】

2.1配制氧化劑工作液：取適量的氧化劑，按氧化劑：蒸餾水=1：99的比例混合，即得到氧化劑工作液。

本氧化劑工作液+4℃保存，3個(gè)月有效。需注意，氧化劑有腐蝕性，小心操作，做好防護(hù)工作。

2.2取成熟將要開放的新鮮花朵，小心去除花瓣和雌蕊。

2.3將花粉物質(zhì)置于潔凈載玻片上，分別滴加配制好的芳香胺顯色液、氧化劑工作液各1滴，混勻，蓋上蓋玻片。

【注】：染色時(shí)需將花粉完quan浸沒于染色液中；

2.4 30℃恒溫箱孵育10~15min，低倍顯微鏡觀察著色情況，每片取5個(gè)視野。

2.5統(tǒng)計(jì)100?；ǚ鄣念伾?/p>

三、染色結(jié)果觀察：

活力強(qiáng)——紫紅色；

活力弱——淡紅色；

無活力或不育——無色。

計(jì)算：觀察并統(tǒng)計(jì)100?；ǚ?，計(jì)算有活力花粉的百分?jǐn)?shù)，其公式為：

花粉活力百分?jǐn)?shù)（%）=有活力花粉數(shù)/100 ×100%

染色示例（來自文獻(xiàn)，僅做參考）

文獻(xiàn)來源1）Li M, Jiang F, Huang L, Wang H, Song W, Zhang X, Zhang Y, Niu L. Optimization of In Vitro Germination, Viability Tests and Storage of Paeonia ostii Pollen. Plants (Basel). 2023 Jun 27;12(13):2460. doi: 10.3390/plants12132460. PMID: 37447022; PMCID: PMC10346979.

試驗(yàn)對(duì)象：鳳丹（Tree peony (Paeonia ostii)）

試驗(yàn)?zāi)康模?/strong>比較九種不同的花粉活力檢測(cè)方法，包括：MTT、醋酸洋紅、TTC、I2-KI、benzidine-H2O2、 過氧化物酶、亞甲基藍(lán)、FDA等，來鑒別有活力和無活力花粉。

試驗(yàn)結(jié)果：

FigComparison of the nine staining methods of Paeonia ostii pollen grains. (A) MTT staining method; (B) Acetic carmine staining method; (C) TTC staining method; (D) I2-KI staining method; (E) Benzidine-H2O2 staining method; (F) Peroxide staining method; (G) Methylene blue staining method; (H) Inorganic acid staining method, and (I) FDA staining method. Grey arrows indicate non-viable pollen; red arrows indicate viable pollen.

試驗(yàn)結(jié)論：本課題中發(fā)現(xiàn)MTT、TTC、benzidine-H2O2、FDA能有效區(qū)分有活力和無活力花粉，其中，F(xiàn)DA染色結(jié)果與花粉萌發(fā)結(jié)果類似。

文獻(xiàn)來源2） Weng Z, Deng Y, Tang F, Zhao L, Zhao L, Wang Y, Dai X, Zhou Z, Cao Q. Screening and optimisation of in vitro pollen germination medium for sweetpotato (Ipomoea batatas). Plant Methods. 2023 Aug 29;19(1):93. doi: 10.1186/s13007-023-01050-w. PMID: 37644497; PMCID: PMC10463589.

試驗(yàn)對(duì)象：紅薯（sweetpotato (Ipomoea batatas)）

試驗(yàn)?zāi)康模?/strong>花粉活力測(cè)定

試驗(yàn)圖片：

FigComparison of different pollen viability testing methods. (a) I2-KI, bar =?200 μm. (b) TTC, bar =?200 μm. (c) Magenta acetate, bar =?200 μm. (d) FDA, bar =?200 μm. (e, f) In situ germination, bar?=?500 μm. (g) In vitro germination, bar =?100 μm. (h) Active pollen rates measured by TTC, Magenta acetate, FDA and in vitro germination. Different letters indicate statistically significant differences (P?<?0.001), and error bars represent standard deviations

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— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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