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江蘇菲亞生物科技有限公司
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WB實(shí)驗的錦囊妙計
2017-3-9 閱讀(1033)
Western Blot實(shí)驗它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的信息。于此同時，我們好多客戶反映做該實(shí)驗檢測失敗，由此分析：WB實(shí)驗真的不好做，還是客戶沒有把握好WB實(shí)驗的注意事項或者小訣竅？現(xiàn)恒遠(yuǎn)公司年終總結(jié)做WB實(shí)驗的錦囊妙計：
1.清洗好玻璃板，我公司技術(shù)強(qiáng)調(diào)這一步工作不能偷懶，很多時候跑完電泳撬膠時會因為玻璃板不干凈膠粘在板上把膠撬破。
2. 配膠時不要反復(fù)用槍混，稍微搖混就可以了，用槍混多次會導(dǎo)致膠凝不好影響電泳圖的分辨率。
3. AP 分裝成500 微升一管保存放20 度，避免 AP 用太久失效。
4. 倒膠時把玻璃板中的水用濾紙盡量吸干，因為微量的水存在會影響配的膠濃度。
5. 盡量不用過ye放室溫或者四度的膠，也回影響膠 的分離效果。
6. 電泳完撬膠時根本不需要用撬膠板，在一平皿里裝好水，把有膠一面的放在水中晃動幾
次膠很容易就脫落下來，一點(diǎn)沒有問題，方便的很。
7. 點(diǎn)樣時樣品別忘了離心這步，因為上樣含有固體沉淀會影響電泳圖分辨效果。
8.盡量在冰浴狀態(tài)下跑
